胸腺五肽聯(lián)合乙肝疫苗治療慢性乙型肝炎療效分析

　　【摘要】 目的 觀察胸腺五肽聯(lián)合乙肝疫苗治療慢性乙型肝炎的療效。方法 應(yīng)用時(shí)間分辨免疫熒光分析法檢測胸腺五肽聯(lián)合乙肝疫苗治療組、單用乙肝疫苗治療組、單用胸腺五肽組、一般護(hù)肝組治療前后乙肝病毒標(biāo)志物滴度的變化。結(jié)果胸腺五肽聯(lián)合乙肝疫苗組HBsAg、HBsAb、HBeAg滴度較其他組差異有顯著性（P<0.05），HBeAb差異無顯著性（P>0.05）;聯(lián)合組治療后HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率與單用乙肝疫苗治療組、單用胸腺五肽組差異無顯著性（P>0.05），與一般治療組的差異有顯著性（P<0.05）。結(jié)論胸腺五肽聯(lián)合乙肝疫苗有明顯降低HBsAg、HBeAg和升高HBsAb的作用，是治療慢性乙型肝炎有效的治療方法。

　　關(guān)鍵詞 胸腺五肽 乙肝疫苗 慢性乙型肝炎 時(shí)間分辨免疫熒光分析

　　 Analysis on therapeutic effectiveness of thymopentin combination with  hepatitis B vaccine on patients suffered from chronic hepatitis

　　B   He Xing’e，Tang Xianming，Wang Gufeng，et al.

　　Liver Disease Research Center，The Second Xiangya Hospital of Central South University，Changsha410011.

　　【Abstract】 Objective To observe therapeutic effectiveness of Thymopentin combined with hepatitis B vaccine on patients suffered from chronic hepatitis B（CHB）.Methods To detect the alteration of HBV-M tite of Thyˉmopentin combinated with hepatitis B vaccine、single hepatitis B vaccine or Thymopentin and regular treatment group by time-reolved fluoroimmunoassay（TRF）.Results HBsAg、HBsAb、HBeAg tite of Combination group had deˉcreased significantly compared with hepatitis B vaccine、Thymopentin and regular treatment group（P<0.05）;HBV-DNA negative rate of Combination group had increased significantly compared with regular treatment group（P<0.05）.Conclusion Thymopentin sombinated with hepatitis B vaccine which can significantly decrease HBsAg、HBeAg tite and increase HBsAb tite，is an effective therapy for chronic hepatitis B.

　　 Key words thymopentin hepatitis B vaccine Chronic hepatitis B time-resolved fluoroimmunoassay 

　　我國是慢性乙型肝炎病毒感染的高發(fā)地區(qū)，成人HBˉsAg攜帶率為10%以上。多年以來國內(nèi)外學(xué)者一直致力于慢性乙肝抗病毒的研究，取得了不少進(jìn)展，到目前仍無特效療法。雖然α-干擾素、拉米呋定等抗病毒藥物作用已被公認(rèn)，但其毒副作用多，特別對(duì)一部分長期處于“免疫耐受”的乙肝病人無明顯療效。胸腺五肽（Thymopentin）與胸腺素α 1 都是胸腺分泌的激素，具有雙向免疫調(diào)節(jié)功能。近年來用胸腺五肽治療乙肝的報(bào)道較多，并取得了一定療效。但是用胸腺五肽與乙肝疫苗聯(lián)合治療乙肝的報(bào)道極少。筆者結(jié)合多年臨床實(shí)踐，采用此方法治療，觀察其免疫調(diào)節(jié)，抗乙肝病毒效果。在應(yīng)用腺腺五肽與乙肝疫苗聯(lián)合治療乙肝的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)該方法治療效果滿意，對(duì)HBV-M有明顯的影響，現(xiàn)收集其治療經(jīng)過予以介紹。

　　1 材料和方法

     1.1 病例選擇 全部病例均為本科部分門診就醫(yī)的HBˉsAg陽性，HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者，診斷均符合2000年病毒性肝炎會(huì)議修訂標(biāo)準(zhǔn)［2］  。胸腺五肽聯(lián)合乙肝疫苗治療組54例中，男40例，女14例，年齡18～56歲，平均年齡31歲;單用乙肝疫苗治療組34例，男28例，女6例，年齡16～52歲，平均年齡32歲;單用胸腺五肽組27例，男  18例，女9例，年齡16～53歲，平均年齡29歲;一般護(hù)肝組33例，男24例，女9例，年齡15～51歲，平均年齡35歲。4組病人治療前肝腎功能等主要臨床資料比較，差異均無顯著性，具有可比性。

　　1.2 TRF法檢查HBV-M 試劑為上海新波生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，采用Anytest2000時(shí)間分辨儀，嚴(yán)格按產(chǎn)品說明書操作。乙型肝炎病毒標(biāo)志物（HBV-M）是反應(yīng)病情的重要指標(biāo)，臨床工作中一般采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測HBV-M，而ELISA是一個(gè)定性方法，易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。本研究采用的時(shí)間分辨免疫熒光分析法（TRF），是定量檢測法，具有高敏感性、特異性強(qiáng)、無放射污染等特點(diǎn)［1］  ，能夠更精確的動(dòng)態(tài)觀察HBV-M滴度的變化。

　　 1.3 HBV-DNA含量測定 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法，試劑盒購自廣州中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心。儀器為美國Perkin Elmer公司GeneAmpPE5700型PCR儀，嚴(yán)格按產(chǎn)品說明書操作，檢測靈敏度為10 3 拷貝/ml。

　　1.4 材料 胸腺五肽由海南中和藥業(yè)有限公司制藥廠生產(chǎn)（1mg/支），乙肝疫苗由衛(wèi)生部北京生物制品研究所生產(chǎn)（10μg/支）。

     　1.5 治療方法 （1）胸腺五肽聯(lián)合乙肝疫苗治療組:胸腺五肽注射液1mg肌內(nèi)肉注射，初始20天，每天1次;繼后隔日1次，療程5個(gè)月;乙肝疫苗30μg，上臂三角肌肌肉注射，每20天1次，療程5個(gè)月。（2）單用乙肝疫苗30μg，上臂三角肌肉注射，初始20天，每天1次，繼后隔日1次，療程5個(gè)月。（3）單用胸腺五肽組:胸腺五肽注射液1mg肌肉注射，初始20天，每天1次，繼后隔日1次，療程5個(gè)月。（4）一般護(hù)肝組治療組:均口服維生素等一般藥物護(hù)肝治療。

    　1.6 觀察指標(biāo) 治療前和治療結(jié)束后行HBV-M的定量，HBV-DNA（PCR）檢測。

   　 1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 各組治療前后均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，組間比較采用X 2 檢驗(yàn)，P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著性。

　　2 結(jié)果

    　2.1 TRF檢測HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb結(jié)果聯(lián)合組治療前后比較HBsAg、HBeAg的滴度均明顯下降，而保護(hù)性HBsAb卻明顯上升，差異有顯著性（P<0.05），聯(lián)合組治療結(jié)果的好轉(zhuǎn)程度優(yōu)于其他組，結(jié)果差異有顯著性（P<0.05），見表1。表1 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb結(jié)果 （略） 注:治療后與治療前比較 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01，聯(lián)合組與其他組比較P<0.052.2 HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率 HBV-DNA<10 3 /ml為陰性。聯(lián)合組治療后HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率與單用乙肝疫苗治療組、單用胸腺五肽差異無顯著性（P>0.05），與一般治療組的差異有顯著性（P<0.05）見表2 表2 HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率 （略）

    　2.3 不良反應(yīng) 所有的病人在治療期間均定期檢測血尿常規(guī)和肝腎功能，沒有發(fā)現(xiàn)任何毒副作用。

　　3 討論

　　現(xiàn)已證實(shí)，人體抗病毒免疫功能低下、免疫調(diào)節(jié)紊亂以及免疫耐受是造成慢性乙型肝炎病毒呈持續(xù)感染狀態(tài)的重要原因，也是治療上的一個(gè)難點(diǎn)。因此治療慢性乙型肝炎的基本策略是提高宿主抗病毒的免疫功能。CHB抗病毒治療，α-干擾素、拉米夫定等核苷類藥物是目前臨床上公認(rèn)有效的藥物。但是有效率也只有30%～60%，干擾素、拉米夫定各有一定的副作用，有其嚴(yán)格的適應(yīng)證，處于免疫耐受狀態(tài)的CHB患者效果差。而拉米夫定極易誘發(fā)HBV的變異株。因此，近年來臨床上大多采用聯(lián)合用藥以克服單獨(dú)抗病毒藥的副作用。我們?cè)囉谩?font color='#733C29'>胸腺五肽+乙肝疫苗”的聯(lián)合療法，在抗病毒打破免疫耐受方面確有一定療效，可能與激活機(jī)體自身免疫的清除功能、打破機(jī)體的免疫耐受狀態(tài)有關(guān)。聯(lián)合組HBV-M的HBsAg、HBeAg的滴度均明顯下降，而保護(hù)性HBsAb滴度卻明顯上升，指標(biāo)的改善程度均優(yōu)于其他治療組;所有用藥患者在2個(gè)月左右查ALT正常，說明在治療的同時(shí)能夠在一定程度上保護(hù)肝功能。聯(lián)合組治療后HBV-DNA陰轉(zhuǎn)率與其他組的差異性不明顯，但有改善趨勢，說明該治療方法仍有一定抗病毒作用。胸腺五肽是胸腺生成素的有效成分，有資料顯示其能使血液中超氧化物歧化酶含量升高，超氧負(fù)離子自由基含量顯著下降的功能，此外還具有誘導(dǎo)T細(xì)胞分化作用，與T細(xì)胞特異受體結(jié)合，使細(xì)胞內(nèi)cAMP水平上升，從而誘導(dǎo)一系列胞內(nèi)反應(yīng)，達(dá)到調(diào)節(jié)免疫功能的作用［3］  。提示其對(duì)抑制乙肝病毒復(fù)制有一定療效，同時(shí)癥狀改善，肝功能ALT等好轉(zhuǎn)，表明對(duì)改善肝臟炎癥活動(dòng)有一定作用。治療中無明顯不良反應(yīng)，本文發(fā)現(xiàn)隨療程的延長，胸腺五肽對(duì)病毒抑制作用也相應(yīng)提高。乙肝疫苗可通過“旁路”激活機(jī)體處于免疫耐受成或低下狀態(tài)的免疫細(xì)胞，提高特異性免疫應(yīng)答、刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性抗體、清除血液內(nèi)病毒，而病毒一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)，抗體即失去作用［4］  。

　　因此，乙肝疫苗與胸腺五肽聯(lián)合應(yīng)用可增強(qiáng)其抗原性，通過免疫反應(yīng)類型的改變，盡可能多地激活細(xì)胞免疫反應(yīng)，能最終達(dá)到清除細(xì)胞內(nèi)病毒和改善病情的目的。同時(shí)本研究應(yīng)用TRF檢測HBV-M是一定量檢測，這樣在治療過程中我們能夠精確的動(dòng)態(tài)觀察HBV-M滴度的改變，了解病情變化。

　　本實(shí)驗(yàn)表明上述聯(lián)合療法，在抗病毒、調(diào)節(jié)免疫、打破免疫耐受等方面確有一定療效，同時(shí)未增加不良反應(yīng)，值得臨床應(yīng)用。