消癌平片中綠原酸的含量測定

    消癌平片由烏骨藤單味藥組成，具有抗癌，消炎，平喘功能。消癌平片用于食道癌、胃癌、肺癌，對大腸癌、宮頸癌、白血病等多種惡性腫瘤，亦有一定療效，亦可配合放療、化療及手術(shù)后治療。消癌平片并用于治療慢性氣管炎和支氣管哮喘。從目前文獻(xiàn)報道來看，消癌平片含有多種甾體皂苷、生物堿、有機(jī)酸、多糖、樹脂及色素等化學(xué)成分，且各種成分的含量均較低，活性成分亦不明確。為有效控制消癌平片的質(zhì)量，選擇指標(biāo)性成分綠原酸作為質(zhì)量控制的含量指標(biāo)。方法簡便、靈敏、穩(wěn)定、可靠 。 

    建立HPLC法測定消癌平片中綠原酸含量的方法。 

    實驗儀器與試藥 

    島津LC．10AT高效液相色譜儀(紫外檢測器，N2000工作站，浙江大學(xué))；AS3120A超聲波清洗器(天津)；AE240十萬分之一電子天平(瑞士)，AK2140萬分之一電子天平(上海奧豪斯公司)。乙腈(色譜純)，其它化學(xué)試劑均為分析純。綠原酸對照品t購自中國藥品生物制品檢定所。純度：以歸一化法含量測定，對照品純度
大于97％。 

    檢測波長的選擇采用紫外分光光度計對綠原酸對照品溶液在200～4oo nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在327 nm波長處為最大吸收峰，因此，選定327 nm為檢測波長。 

    系統(tǒng)適用性試驗考察色譜柱：Diamonsil C18(4、6×150 mm，5 m)；流動相i乙腈-水-磷酸(9：91-0、5)；流速：1．0 ml／min；柱溫：30~C；檢測波長：327 nm；在上述色譜條件下，供試品中綠原酸與其它組分分離度良好，確定本品的理論板數(shù)按綠原酸峰計不得低于4000(2，3)。 

    線性關(guān)系考察精密稱取綠原酸對照品適量，以甲醇溶解，制成濃度為0．0425 mg／ml的對照品溶液。精密吸取2．0、4．0、6．0、8．0、10．0 wl注入液相色譜儀中，測定。結(jié)果以綠原酸進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性方程：Y=1296072X一11177，r=0．9997，線性范圍：0、0850 ～0．4250 g。 

    供試品溶液制備取本品10片，除去包衣后，精密稱定，研細(xì)，稱取約1．5 g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入50％ 甲醇20 ml，密塞，稱定重量，超聲提取30 min，放冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，過0．45 m的濾膜，即得供試品溶液。 

    精密度試驗精密吸取上述供試品溶液，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案含量測定方法檢驗5次，每次進(jìn)樣10 l，測得綠原酸峰面積積分值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1、5％ ，表明儀器精密度較高，可靠性強(qiáng)，方法可行。 ‘ 

    穩(wěn)定性試驗精密吸取上述供試品溶液，在0、2?4 8 12h各進(jìn)樣10wl，測得綠原酸峰面積積分值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1．9％ ，說明樣品在12 h內(nèi)穩(wěn)定。 

    重復(fù)性試驗取同一批(批號：20040401)樣品粉末5份，精密稱定，精密加入50％ 甲醇20 ml，超聲提取30 vain，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案含量測定方法檢驗5次，每次進(jìn)樣10 l，測得結(jié)果綠原酸含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2．2％ ，表明方法重復(fù)性較好。 

    加樣回收率試驗取已知含量的消癌平樣品5份(批號：20040401，含量：0．2795 mg／g)，每份約0、80 g，精密稱定，分別精密加入對照品溶液10 ml(濃度為0．02125 mg／m1)，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案含量測定項下供試品溶液制備和含量測定方法，制備供試品溶液并進(jìn)行含量測定，計算回收率，綠原酸對照品的平均回收率為98．8％ ，RSD為2．1％ 。說明本法回收率好，方法可行。 

    樣品含量測定分別取3批成品，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案含量 計，不得少于0．040 mg。通過綠原酸的含量測定，可有效控測定方法項下條件進(jìn)行測定，計算。 制消癌平片的質(zhì)量。 

    根據(jù)上述3批消癌平片試驗結(jié)果，綠原酸最低含量為0．0482 me,／片，暫定本品每片含烏骨藤以綠原酸(C16H1809)。結(jié)論該法簡便準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可作為消癌平片質(zhì)量控制的依據(jù)之一。 

    (本文節(jié)選自《消癌平片中綠原酸的含量測定》)

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