目的:觀察仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對小鼠免疫力的影響。
1 材料和方法
1.1.1樣品
仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊由福建仙芝樓生物科技有限公司提供,為瓶裝膠囊,內容物為褐色粉末。置于密閉、陰涼干燥處保存,供試驗用。臨用時用色拉油配制到所需濃度。
1.1.2主要試劑:DNFB、SRBC、豚鼠血清、印度墨汁
1.2試驗動物
18~22g健康雌性昆明種小鼠120只,由中國藥科大學實驗動物中心提供,合格證號:蘇動質字第98004號。隨機分為3個試驗組,分別進行炭粒廓清試驗、DTH試驗和血清溶血素測定試驗。
1.3劑量
每個試驗組分別分為40mg/kg(低劑量組)、400mg/kg(中劑量組)、1200 mg/kg(高劑量組)和空白對照組。經口每日一次給于小鼠相應劑量的受試物,空白組給于等劑量的色拉油。連續給藥30 d后測量各項增強免疫力功能指標。
1.4主要儀器:TIO00型電子動物稱、722型分光光度計、打孔器
1.5試驗方法
1.5.1 小鼠炭粒廓清試驗:各劑量組連續灌胃30d,每鼠尾靜脈注入4倍稀釋的印度墨汁(0.1ml/10g.bw),注入2min及10min分別從眼內眥靜脈叢取血20ul,并將其加到2m10.1%Na2C03溶液中,用722型分光光度計在600nm波長處測定光密度值。
1.5.2 DNFB誘導小鼠DTH試驗(耳腫脹法):
各劑量組連續灌胃30d。每鼠用剪刀將腹部毛剪去,范圍約3cmX3cm,用1%DNFB溶液50ul均勻涂抹致敏。5日后用1%DNFB溶液lO u l均勻涂抹于小鼠右耳進行攻擊,同時用不含DNFB的溶液10ul均勻涂抹于小鼠左耳作對照。攻擊后24h頸椎脫臼處死小鼠,剪下左右耳殼,用打孔器取下直徑8mm耳片,稱重。左右耳片總量之差為腫脹度。同時取下小鼠脾臟、胸腺并稱重,計算臟器系數。
1.5.3血清溶血素測定試驗:
各劑量組連續灌胃30d。制備2 的綿羊紅細胞(SRBC)懸液,每只鼠腹腔注射0.2ml進行免疫,4d后摘除眼球取血于離心管中,放置lh,200r/min離心10min,分離并收集血清。血清200倍稀釋后,按檢驗方法測定樣品管及SRBC半數溶血時的光密度值。溶血素的量以半數溶血值(HCSO)表示。
2 結果
2.1仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對小鼠炭粒廓清作用的影響
2.2仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對DNFB誘導小鼠DTH的影響的結果,高劑量組小鼠胸腺/體重比值與對照組比較。
2.3仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊對小鼠血清溶血素形成的影響 對照組相比較差異性顯著(P<0.05)。
從目前公開發表的研究報告中可以看出靈芝多糖的免疫調節作用主要集中在以下幾個方面:促進單核/巨噬細胞系統的吞噬功能、促進細胞免疫功能、調節體液免疫功能、抗過敏、抗輻射和抗免疫抑制等。仙芝樓靈芝孢子油軟膠囊富含靈芝孢子經物理破壁,超臨界C0萃取所得到的多糖和多肽,前期實驗表明其在抗腫瘤,改善心腦血管疾病方面都要一定效果,本試驗擬考察靈芝孢子油軟膠囊對免疫系統的影響。
(本文節選自《靈芝孢子油軟膠囊增強免疫力的研究》)