重癥急性胰腺炎(SAP)是一種嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的疾病，病情兇險(xiǎn)，病死率高，為臨床常見(jiàn)急腹癥之一。在其治療方面仍以非手術(shù)治療為主，西藥和中藥各有優(yōu)勢(shì)。

    重癥急性胰腺炎(SAP)是一種嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的疾病，病情兇險(xiǎn)，病死率高，為臨床常見(jiàn)急腹癥之一。在其治療方面仍以非手術(shù)治療為主，西藥和中藥各有優(yōu)勢(shì)。本研究旨在探討靈芝孢子粉和奧曲肽合用的效果，以期為臨床治療提供新思路。

　　1  材料與方法
　　1.1  材料  動(dòng)物：選擇成年SD大鼠70只，雌雄各半，體重為220g～280g，由佳木斯大學(xué)動(dòng)物中心提供。藥物與試劑：牛磺膽酸鈉，美國(guó)Sigma公司；奧曲肽，印度太陽(yáng)藥業(yè)有限公司；靈芝孢子粉，上海康舟真菌多糖有限公司；淀粉酶（AMS）測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所；鱟試劑測(cè)試盒：上海伊華臨床醫(yī)學(xué)科技公司。主要儀器：多管架自動(dòng)平衡離心機(jī)，長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司；760CRT雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司。

　　1.2  方法
　　1.2.1  動(dòng)物分組及模型制備  將70只大鼠隨機(jī)分為五組，每組14只：Ⅰ組為假手術(shù)組，Ⅱ組為SAP模型組（簡(jiǎn)稱(chēng)模型組），Ⅲ組為奧曲肽治療組（簡(jiǎn)稱(chēng)奧曲肽組），Ⅳ組為靈芝孢子粉治療組（簡(jiǎn)稱(chēng)靈芝組），Ⅴ組為靈芝孢子粉和奧曲肽聯(lián)合治療組（簡(jiǎn)稱(chēng)奧靈聯(lián)合組）。術(shù)前均禁食12h，自由飲水。25%烏拉坦溶液腹腔注射麻醉（4ml/kg）。將其常規(guī)備皮、消毒鋪巾后，沿腹白線(xiàn)切開(kāi)入腹，沿十二指腸找到胰腺，確認(rèn)膽胰管。先將肝門(mén)處膽總管暫時(shí)結(jié)扎，然后在膽胰管開(kāi)口十二指腸系膜緣對(duì)側(cè)腸壁上選一無(wú)血管區(qū)，用微量注射器（4號(hào)針頭）穿刺進(jìn)入膽胰管1cm 左右，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組均以0.1ml/min的速度緩緩?fù)迫?%牛磺膽酸鈉(ST)0.1ml/100g，推注結(jié)束后，拔出注射器輕壓穿刺點(diǎn)處持續(xù)10min，然后解除肝門(mén)處結(jié)扎，并確認(rèn)腹腔無(wú)破損；逐層關(guān)腹即可。Ⅰ組僅注入生理鹽水，劑量和速度同牛磺膽酸鈉。

    1.2.2  給藥方法  （1）各組動(dòng)物均于術(shù)后即時(shí)開(kāi)始給藥；（2）Ⅰ、Ⅱ組僅給予生理鹽水1ml/100g灌胃，2次/ d；（3）Ⅲ組除生理鹽水1ml/100g灌胃外，腹腔注射奧曲肽10μg/kg，2次/d；（4）Ⅳ組除補(bǔ)充生理鹽水外，靈芝孢子粉灌胃2g/kg，2次/d；（5）Ⅴ組在補(bǔ)充生理鹽水，腹腔注射奧曲肽的同時(shí)，靈芝孢子粉灌胃2g/kg，2次/d。

    1.2.3  血清淀粉酶(AMS)含量的檢測(cè)  各組大鼠于術(shù)后6h、12h、24h分別檢測(cè)AMS含量。用乙醚將大鼠淺麻醉后，從其眼內(nèi)眥靜脈處取血，裝于潔凈試管內(nèi)，3000rpm離心10min，取血清檢測(cè)。具體操作步驟按淀粉酶測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。計(jì)算公式為：   
    血清淀粉酶AMS（u/dL）=（空白管吸光度-測(cè)定管吸光度）/空白管吸光度×800

    1.2.4  血漿內(nèi)毒素含量的檢測(cè)  大鼠斷髓后，將其固定放于超凈工作臺(tái)內(nèi)，充分暴露心臟，直視下用無(wú)菌注射器采集心臟血置于無(wú)菌肝素化的試管中，500rpm離心5min后，取血漿置于無(wú)熱源試管中待檢，其它操作步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。按計(jì)算公式A=As-（Ab-Abb）求得吸光度A值，再查對(duì)內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求得內(nèi)毒素含量。

　　1.2.5  胰腺組織病理學(xué)檢查  取出動(dòng)物胰腺組織，用 10%福爾馬林溶液固定，石蠟包埋切片，HE染色后，用光鏡觀察。

    1.2.6  數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法  將各組存活動(dòng)物的所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)都以 “均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）” 表示，應(yīng)用SPSS10.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，采用兩樣本t檢驗(yàn)和多個(gè)處理組間單因素方差分析，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2  結(jié)果
    2.1  AMS含量的檢測(cè)結(jié)果
    2.1.1  模型組與假手術(shù)組AMS的定量檢測(cè)  正常大鼠循環(huán)血中含有一定量的淀粉酶，SAP時(shí)血清淀粉酶含量顯著上升（P<0.05）。
    2.1.2  各治療組與模型組AMS的定量檢測(cè)  奧曲肽組和奧靈聯(lián)合組均能使血清淀粉酶含量明顯下降，與模型組、靈芝組相比，差異顯著（P<0.05），說(shuō)明在降低血清淀粉酶方面這兩組均有效，且與奧曲肽組比較，奧靈聯(lián)合組效果更好（P<0.05）。靈芝組在6h、12h時(shí)，血清淀粉酶含量與模型組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），在24h時(shí)可降低其含量（P<0.05），說(shuō)明單用靈芝孢子粉不能及時(shí)有效降低血清淀粉酶。
    在各組間進(jìn)行顯著性比較時(shí)，假手術(shù)組用 “JS” 表示，模型組用 “MX” 表示，奧曲肽組用 “AQ” 表示，靈芝組用 “LZ” 表示，奧靈聯(lián)合組用 “AL” 表示

    2.2  血漿內(nèi)毒素含量的檢測(cè)結(jié)果
    2.2.1  模型組與假手術(shù)組血漿內(nèi)毒素含量的定量檢測(cè)  假手術(shù)組大鼠體循環(huán)內(nèi)存在極微量的內(nèi)毒素，SAP模型組與假手術(shù)組相比，血漿內(nèi)毒素含量明顯升高（P<0.05）。

    2.2.2  各治療組與模型組血漿內(nèi)毒素含量的定量檢測(cè)  各治療組與模型組比較，均能使血漿內(nèi)毒素水平降低（P<0.05）；奧靈聯(lián)合組與其他治療組相比，效果更明顯，差異顯著（P<0.05），說(shuō)明在降低內(nèi)毒素水平方面，靈芝孢子粉與奧曲肽合用效果更好。

    2.3  胰腺組織病理學(xué)檢查結(jié)果  SAP模型組胰腺結(jié)構(gòu)不清，點(diǎn)狀或局灶性壞死；炎性細(xì)胞大量浸潤(rùn),紅細(xì)胞滲出極明顯。經(jīng)奧曲肽和靈芝聯(lián)合應(yīng)用治療后，病變明顯減輕。

    3  討論 
    重癥急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，隨著腸屏障功能受損，引起細(xì)菌及內(nèi)毒素移位，從而造成胰腺及胰周壞死感染［1］。在SAP病程中，由于多種因素可造成腸缺血，腸壁血管通透性增加，乃至發(fā)生腸麻痹腸梗阻，繼發(fā)腸道細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)和腸黏膜屏障破壞，一方面腸道細(xì)菌移居至壞死胰腺組織和其他臟器并釋放內(nèi)毒素，另一方面腸道內(nèi)毒素通過(guò)受損的腸黏膜屏障吸收，導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥。內(nèi)毒素既可加重原有胰腺損害，又可誘發(fā)全身代謝和血液動(dòng)力學(xué)紊亂，參與多種并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展，嚴(yán)重影響胰腺炎患者的預(yù)后［2］。臨床觀察表明，內(nèi)毒素血癥的程度與急性壞死型胰腺炎的嚴(yán)重度密切相關(guān)。因此，促進(jìn)腸蠕動(dòng)，調(diào)整腸道微生態(tài)，加強(qiáng)內(nèi)毒素排泄，保護(hù)腸道屏障功能，從而減輕內(nèi)毒素血癥成為急性胰腺炎治療的有效手段之一。

    奧曲肽是臨床治療胰腺炎的常用藥，其能迅速、有效地阻止胰酶的釋放和活化，阻斷胰腺自身組織的消化［3］。靈芝孢子粉是靈芝的繁殖器官，集中了靈芝的精華，因而具有比靈芝更好的藥理作用。現(xiàn)代研究已證實(shí)了靈芝孢子粉具有抗癌、免疫、保肝、抗炎、清除自由基、活血化瘀和改善胰臟血液循環(huán)等功能［4��5］。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)靈芝孢子粉與奧曲肽聯(lián)合應(yīng)用治療后，胰腺腺泡明顯恢復(fù)。因此推測(cè)其SAP的機(jī)制可能為：保護(hù)腸道屏障功能、活血化瘀、保護(hù)胰腺細(xì)胞等。

    【參考文獻(xiàn)】
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　　［2］ Windsor JA， Fearon KC， Ross JA， et al. Role of serum endotoxin and antiendotoxin core antibody levels in predicting the development of MOF in acute pancreatitis［J］. Br J Surg，1993，80(8)：1042��1046.
　　［3］ Binder M，Uhl W，F(xiàn)riess H，et al. Octreotide in the treatment of acute pancreatitis. results of a multicenter prospective trial with three different octreotide dosages ［J］. Digestion，1994，55(Suppl 1)：20.
　　［4］ 金春花，等.靈芝多糖活血化淤作用實(shí)驗(yàn)研究［J］.中草藥，1998，29(7)：470.
　　［5］ 章靈華，肖培根.靈芝抱子粉提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病的防治作用［J］.中草藥，1993，24(5):246��247，272.

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