克銀丸是由土茯苓、白鮮皮、北豆根、拳參四味中藥材組成的復(fù)方制劑，有清熱解毒、祛風(fēng)止癢的功能。拳參是克銀丸方中主藥之，具有清熱解毒、消腫止痛的功效。原質(zhì)量標準沒有含量測定方法，為了有效地控制該藥的內(nèi)在質(zhì)量，選用高效液相色譜法測定克銀丸處方拳參藥材中沒食子酸的含量，方法操作簡便、重現(xiàn)性好，可作為控制該藥品內(nèi)在質(zhì)量的定量指標。 
   
1  儀器與試藥 
    島津LC-10AT高效液相色譜儀，SPD-10AVP檢測器；sartorius電子天平；KQ-100型超聲波清洗器；甲醇為色譜純試劑，其他試劑為分析純；沒食子酸對照品（批號為11083-200302，供含量測定用，購自中國藥品生物制品檢定所）；克銀丸。 

   
2  方法 
    2.1  對照品溶液的制備  精密稱取沒食子酸對照品適量，加甲醇制成每1ml含28.5μg的溶液。 
    
    2.2  供試品溶液的制備  取克銀丸50粒，研細，取1g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，冷卻，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，濾液作為供試品溶液。 
    
    2.3  色譜條件 
     2.3.1  測定波長的選擇  取沒食子酸對照品溶液，在200~400nm波長處進行掃描，結(jié)果在274nm波長處具有最吸收，故選擇274nm作為檢測波長。 
    2.3.2  系統(tǒng)適應(yīng)性試驗  色譜柱：Diamansil C18（250mm×4.6mm,5μl）；流動相：乙腈-0.1%磷酸（8：92）；柱溫35℃；流速：0.8ml/min；測定波長：274nm。根據(jù)上述色譜條件，取供試品與對照品溶液，進樣量10μl，理論塔板，按沒食子酸峰計算應(yīng)不得低于3000（N=6435，計算機給出）。 

    
    2.4  方法學(xué)考察 
    2.4.1  標準曲線制備  精密吸取對照品溶液4、8、12、16、20μl，分別注入液相色譜儀。以峰面積為縱坐標，進樣量為橫坐標繪制標準曲線。測得回歸方程為Y=7244.5＋1860542.982X（r=1.0000）。表明沒食子酸進樣量在0.1140~0.5700μg內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系。 
    2.4.2  陰性對照試驗  按供試品溶液的制備方法制成不含拳參藥材的陰性對照溶液，吸取該溶液10μl，注入液相色譜儀中，在與沒食子酸相應(yīng)保留時間處，無干擾峰出現(xiàn)。 
    2.4.3  穩(wěn)定性試驗  取對照品溶液在0、5、10、15、20h，分別進樣10μl，按沒食子酸峰面積計，峰面積平均值為528217，RSD為0.3%，結(jié)果未發(fā)生明顯變化。 
    2.4.4  精密度試驗  取對照品溶液10μl，重復(fù)進樣5次，沒食子酸峰面積的平均值為525360，RSD為0.4%。測定結(jié)果表明該方法的精密度良好。 
    2.4.5  重現(xiàn)性實驗  取同批號（批號：040401）的樣品按供試品溶液的制備方法平行制備5份，樣品和對照品溶液各進樣10μl，依法測定，樣品中沒食子酸含量的平均值為1.46mg/g，RS為0.7％，表明本方法重現(xiàn)性良好。 
    2.4.6  回收率試驗  精密稱取經(jīng)同法測定，已知含量的同批號（批號：040401）樣品5份，每份0.5g，再分別加入精密稱取的沒食子酸對照品適量，按供試品溶液的制備方法處理，樣品和對照品溶液各進樣10μl，依法測定，計算回收率，沒食子酸的平均回收率為99.76％，RSD為0.5％。表明本方法準確可信。 
    2.4.7  樣品測定  取5批克銀丸樣品，按供試品溶液的制備方法制備，樣品和對照品溶液各進樣10μl，依法測定，每批測定2次。沒食子酸的平均含量。

    克銀丸為首個口服治療銀屑病的中成藥，是運用現(xiàn)代技術(shù)，從天然中草藥中提取生物因子配伍而成，能有效調(diào)理皮損細胞的正常分化，鞏固外用藥療效，減少銀屑病的復(fù)發(fā)幾率。克銀丸全部選用優(yōu)質(zhì)天然中草藥，利用高科技的提純技術(shù)，有選擇地進行多種物質(zhì)的分離，使毒素和雜質(zhì)徹底清除，有效成分高度富集，質(zhì)量更穩(wěn)定，療效更好、更安全。

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