他克莫司(tacrolimus，簡稱F~06)是日本藤澤公司1984年從鏈霉菌屬培養物中分離得到的大環內酯類新型免疫抑制劑，現已能全合成。主要藥理作用是能有效抑制T淋巴細胞激活，與內源性細胞受體結合，形成一個親免素復合物，從而發揮藥理作用。與環孢素A(CsA)相比，體內外試驗證實他克莫司的免疫活性為CsA的50～100倍 臨床可有效預防器官移植后急性排斥反應，逆轉難治性排斥。CsA治療無效者，65％一80％的患者可使用本品治療。目前他克莫司已在肝、腎、心、胰等器官移植中廣泛用于抗排斥及自身免疫系統相關疾病的治療Ⅲ。本文通過比較國產和進口他克莫司膠囊在健康人體的藥代動力學參數，評價兩種制劑的生物等效性。 

    本試驗中采用的LC—MS／MS法測定受試者體內他克莫司血藥濃度。研究發現，他克莫司在ESI源正離子方式下信號較高，本研究選用M+H1作為MRM掃描方式的母離子，二級碎片掃描時較高的特征碎片有m／z 768．5和m／z 786．5，選用信號較高的碎片離子ndz 768．5作為子離子進行定量，選用ndz 786．5進行定性考察或同步考察。流動相中加入乙酸銨可以提高質譜離子化效率．從而提高信噪比。由于本試驗定量限和檢測限較低．研究初期進行等度洗脫時很難達到目標定量限，為了提高信噪比，使用梯度是較為理想的選擇。本研究所選用的色譜柱孔徑和內徑均較大，可以達到較高的流速．在此條件下采用梯度方式進行梯度洗脫，可以得到較好的色譜峰，降低梯度延遲效應，縮短分析時間。在梯度洗脫條件下，內標的選擇相對來說比較容易，內標選用本研究室現有的對照品曲馬多、地西泮等進行考察。試驗最初選用曲馬多進行試驗。峰型和保留時間均較滿意，但經過長時間進樣后發現內標曲馬多在試驗梯度條件下有柱上累積效應。后改用地西泮，結果較好。

    常見的樣品前處理方案有液一液萃取法、固相萃取法和沉淀蛋白法等，固相萃取法成本較高，液一液萃取法比沉淀蛋白處理繁瑣。本實驗在不影響靈敏度的前提下，采用了極其簡便的沉淀方法，節省了大量的前處理時間，提高了工作效率。對于他克莫司全血樣品而言最為關注的是穩定性問題，試驗中進行了多種穩定性考察。發現全血樣品在冷凍和冷藏條件下均較為穩定。但他克莫司在純水或甲醇環境中易發生結構轉化，因些，試驗過程中應盡量避免此類情況。全血樣品沉淀蛋白的方法可能會比較臟，試驗中最好將色譜溶劑前沿切入廢液罐，以免造成質譜儀的污染。

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