前列腺小體(prostasome)是正常和惡性前列腺腺泡細(xì)胞(acinar cell)產(chǎn)生和分泌的平均直徑為150nm的微小囊泡(microvesicle)。正常情況下,這些囊泡會釋放到精液中。人們早已猜測惡性前列腺細(xì)胞的侵入性生長可能會造成這些囊泡出現(xiàn)在組織間隙空間(interstitial space),隨后進(jìn)入外周血液循環(huán)系統(tǒng)。前列腺小體適合作為前列腺癌癥病人血液中的生物標(biāo)志物業(yè)已通過功能增強(qiáng)型鄰位連接技術(shù)(proximity ligation assay, PLA)的檢驗(yàn)。
研究人員開發(fā)了一個(gè)異常敏感和高特異性的檢測技術(shù)(4PLA)來檢測復(fù)雜的標(biāo)的物結(jié)構(gòu),如微小囊泡,在該囊泡中,首先通過固定化的抗體將標(biāo)的物捕獲,隨后采用四個(gè)附著有DNA鏈的其他抗體來檢測標(biāo)的物。由于需要5個(gè)抗體同時(shí)結(jié)合而產(chǎn)生放大性的報(bào)告信號(reporter),這就使得特異性和靈敏度得以提高。與正常人和良性前列腺活組織切片檢察結(jié)果的人相對照,在未采取根治性前列腺切除治療的前列腺癌癥病人血液樣品中,利用4PLA能成功地檢測到前列腺小體水平顯著性的提高。在兩項(xiàng)獨(dú)立研究當(dāng)中,前列腺癌癥病人血漿中前列腺小體水平的中間數(shù)值比正常人血液樣品的高2.5到7倍。Gleason評分能作為是否需要前列腺切除治療的依據(jù),而4PLA還能將高、中Gleason評分(相應(yīng)為8/9和7)的病人與低Gleason評分(不高于6)的病人區(qū)分開來,因而能反應(yīng)疾病的嚴(yán)重性程度。該方法能夠檢測外周血液中的前列腺小體,可能適合用于在局限性前列腺癌癥的早期診斷和評估。
towersimper注:
1. 鄰位連接技術(shù)(proximity ligation assay,PLA)
一種高靈敏度的蛋白質(zhì)檢測技術(shù),該技術(shù)采用核酸適體(aptamer)或單/多克隆抗體-核酸復(fù)合物作為鄰位連接探針(proximity probes)。當(dāng)一對鄰位探針同時(shí)識別同一個(gè)目標(biāo)蛋白分子時(shí),它們將在空間位置上相互臨近,通過連接反應(yīng)形成一段可擴(kuò)增的DNA標(biāo)簽序列,該標(biāo)簽序列能夠反映待測蛋白的種類及濃度。該技術(shù)將對蛋白質(zhì)的檢測轉(zhuǎn)變?yōu)閷NA核酸序列的檢測,實(shí)現(xiàn)了特殊蛋白質(zhì)的檢測,定量及定位。
2. Gleason評分或分級(Gleason score)
由于Gleason分級與生物學(xué)行為和預(yù)后關(guān)聯(lián)良好,逐漸得到承認(rèn),使用日漸廣泛,成為制定前列腺癌治療方案的重要參考指標(biāo)。20世紀(jì)90年代以來,美國癌癥綜合網(wǎng)推薦的前列腺癌治療指南中,Gleason分級、前列腺特異性抗原(PSA)水平和腫瘤分期是決定治療方案的最重要的指標(biāo)。2004年版WHO泌尿與男性生殖系統(tǒng)腫瘤分類已將Gleason分級納入。
A. 分級和積分:
目前多采用與預(yù)后密切相關(guān)的五級法。
①根據(jù)腺體分化程度,按5級評分(第1級1分,分化好;每遞升1級增加1分;第5級5分,為未分化)。
②對于同一腫瘤不同區(qū)域腺癌結(jié)構(gòu)的變異,按其主要和次要分化程度分別評分,以該兩項(xiàng)評分相加的總分作為判斷預(yù)后的標(biāo)準(zhǔn)(例如腺癌主要結(jié)構(gòu)評為2分,次要結(jié)構(gòu)評為4分,則積分為2+4=6分;只有1個(gè)結(jié)構(gòu)類型,評分為3分,則積分為3+3=6分;穿刺活檢見3個(gè)結(jié)構(gòu)類型以上且最高級別結(jié)構(gòu)數(shù)量少時(shí),一般將最高級別作為次要結(jié)構(gòu)類型)。
③積分為2、3、4分者相當(dāng)于高分化腺癌;5、6、7分者相當(dāng)于中分化腺癌;8、9、10分者相當(dāng)于低/未分化癌。
④Gleason分級適用于前列腺腺癌,不適用于腺鱗癌、尿路上皮癌。
B. 主要結(jié)構(gòu)類型:
①Gleason 1級(很少見):一致性規(guī)則的大腺體,背靠背密集,形成小結(jié)節(jié)。
②Gleason 2級:較不規(guī)則的大腺體,背靠背密集,形成小結(jié)節(jié),結(jié)節(jié)內(nèi)腺體不融合。
③Gleason 3級:浸潤性生長的小腺體或腺泡,或小型篩狀結(jié)構(gòu)腺體。
④Gleason 4級:融合腺體,大型篩狀腺體,或呈腎透明細(xì)胞癌樣。
⑤Gleason 5級:實(shí)性癌巢(無腺樣結(jié)構(gòu)),單個(gè)癌細(xì)胞浸潤,或呈粉刺樣癌(癌細(xì)胞壞死)。

