男性不育精液支原體檢測(cè)藥敏分析

　　支原體是一種介于細(xì)菌與病毒之間，能在人工培養(yǎng)上生長(zhǎng)繁殖的最小原核微生物，與男性泌尿生殖系統(tǒng)的多種疾病有關(guān)，為了探討男性不育的病因及治療方案，檢測(cè)了120名不育者精液中的解脲支原體(UU)和人型支原體(Mycoplasma hominis,MH)，并對(duì)UU和MH進(jìn)行藥敏試驗(yàn)分析。報(bào)告如下。

　　1 資料與方法

　　1.1 一般資料

　　對(duì)照組：生育男性30例，年齡25～38歲。試驗(yàn)組：不育男性120例,已婚同居2年以上,未避孕,年齡23～40歲。

　　1.2 樣本采集

　　手淫法將精液射入無(wú)菌干燥廣口瓶?jī)?nèi),充分液化后，取精漿備用。

　　1.3 檢測(cè)方法

　　支原體培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)采用廣東珠海益明生物工程制品廠生產(chǎn)的支原體培養(yǎng)。鑒定,藥敏一體化試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行。將送檢精液200 μl加入精體培養(yǎng)基中。充分振搖后,將混有精液的培養(yǎng)基分別加入培養(yǎng)孔和藥敏孔中各100 μl,然后每孔加2滴無(wú)茵礦物油,以防水分蒸發(fā),放入35～37℃恒溫箱24～46 h。觀察微孔中培養(yǎng)基顏色變化,分別記錄支原體及10種藥敏結(jié)果，判斷敏感度。各孔培養(yǎng)基清亮,顏色由黃變紅。表明有支原體生長(zhǎng)記為陽(yáng)性,不變色表明無(wú)支原體生長(zhǎng)記為陰性。

　　1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

　　計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2 結(jié)果

　　30例生育組精液中檢出UU 2例,陽(yáng)性率為6.2%;120例不育組精液中檢出UU 31例、MR 6例、UU+MH 10例，陽(yáng)性率為39.17%。2組結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果。見(jiàn)表1。表1 47例UU、MH藥敏結(jié)果比較（略）

　　3 討論

　　不育癥的原因約35%～45%與男方有關(guān)［1］，其中相當(dāng)一部分患者是由于生殖系統(tǒng)的感染。隨著男性學(xué)研究的不斷開(kāi)拓，評(píng)價(jià)男性生育能力的檢測(cè)手段日益更新。檢測(cè)精液中的UU和MH不失為有意義的檢測(cè)手段之一。本文研究結(jié)果表明：支原體感染是不育癥中不可忽視的重要因素。

　　支原體生殖道感染導(dǎo)致男性不育有以下幾方面的機(jī)制：(1)支原體促進(jìn)睪丸炎癥細(xì)胞的侵潤(rùn)，損害精子生成且支原體可穿入生精細(xì)胞中，造成其結(jié)構(gòu)破壞并從曲精小管中脫落，生精細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，從而使精子的數(shù)量減少；(2)支原體吸附于精子表面，攝取精子內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，利用膜內(nèi)膽固醇，耗竭精子的主要成分，使其質(zhì)量功能受損，精子死亡率增高。(3)支原體常吸附于精卵識(shí)別與融合區(qū)，造成精子運(yùn)動(dòng)阻力增大，運(yùn)動(dòng)能力減弱，并妨礙卵子對(duì)精子的識(shí)別、融合等受精過(guò)程［2］。(4)支原體感染后刺激了睪丸生精細(xì)胞，巨噬細(xì)胞產(chǎn)生白介素6(IL��6)和腫瘤壞子因子(TNF��α)［3］，以及支原體可導(dǎo)致白細(xì)胞精子癥，活化的白細(xì)胞分泌可溶性產(chǎn)物TNF��α等［4］而TNF��α、IL��6均可誘導(dǎo)精子凋亡的增加［5］。同時(shí)TNF��α升高后使活性氧(ROS)增高。一方面ROS增高誘發(fā)DNA損傷會(huì)加速生殖細(xì)胞凋亡過(guò)程［6］。另一方面ROS可引發(fā)精子膜上的多聚不飽和脂肪酸發(fā)生脂類過(guò)氧化反應(yīng)，生成的H2O2具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性使精子活率降低。

　　由于支原體缺乏細(xì)胞壁，所以對(duì)影響細(xì)胞壁合成的抗生素不敏感，對(duì)抑制或影響蛋白質(zhì)合成的抗生素敏感。本組47株支原體對(duì)10種抗生素檢測(cè)的敏感率顯示：交沙霉素(95.74%)，強(qiáng)力霉素(91.49%)，阿齊霉素(93.61%)，美滿霉素(89.36%)對(duì)支原體有較高的敏感性，并且在治療中不易產(chǎn)生耐藥性，可作為治療男性不育者感染支原體后的首選藥物。紅霉素，羅紅霉素對(duì)支原體感染的敏感性次之，其抗菌機(jī)制主要是拮抗尿原體DNA旋轉(zhuǎn)酶A和B亞單位，從而阻斷支原體DNA復(fù)制達(dá)到殺滅支原體的目的，可作為次選藥物。氧氟沙星中介度為最高，可能是由于這種抗生素在酸性條件下活性會(huì)下降，但其具有細(xì)胞內(nèi)濃度分布高的特點(diǎn)。傳統(tǒng)使用四環(huán)素治療支原體感染的敏感率在逐年降低，其原因可能是支原體基因組中帶有鏈球菌耐四環(huán)素基因，產(chǎn)生耐藥性所致［7，8］。另外，位于支原體染色體上旋轉(zhuǎn)酶基因發(fā)生突變，使DNA旋轉(zhuǎn)酶靶位改變，從而降低藥物積累產(chǎn)生耐藥性。綜上所述，本研究認(rèn)為：采用支原體培養(yǎng)，鑒定，藥敏一體化的試劑盒檢測(cè)不育者精液中的支原體不僅可區(qū)別于遺傳，免疫，生化等原因?qū)е碌牟挥�，還可使部分原因不明的患者找到病因并得到及時(shí)有效的治療。

　　參考來(lái)源：《河北醫(yī)藥》2008年7月30卷7期；《男性不育 精液 支原體檢測(cè) 藥敏分析》；劉艷波 左一鵬

TAG：男性不育 精液支原體檢測(cè)