富半胱氨酸蛋白61與雌激素受體、孕激素受體在子宮肌瘤中的表達差異

• 復方醋酸棉酚片價格
• 如何購買

• 臨床療效
• 詳細說明書

【摘要】目的 探討富半胱氨酸蛋白61、雌激素受體與孕激素受體在子宮肌瘤中的各自表達情況和相互關系，為明確子宮肌瘤病因提供科學依據。方法 選取入院治療子宮肌瘤并行全切術的45例患者作為試驗組，采用免疫組織化學法，檢測CYR61、ER、PR在子宮全切標本肌瘤組織中的表達，對照組為相應樣本的非瘤平滑肌正常組織。結果 ER和PR在子宮全切標本肌瘤組織中的表達明顯高于對照組，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)；PR的表達水平高于ER，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)；CYR61在子宮全切標本肌瘤組織中的表達明顯低于對照組，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)。結論 CYR61、ER和PR表達與子宮肌瘤的發生有密切關系，三者及其相互作用可能是促進子宮肌瘤繼續發展的重要因素。

【關鍵詞】子宮肌瘤；富半胱氨酸蛋白61；雌激素受體；孕激素受體

子宮肌瘤(uterine leiomyoma，UL)是一種常見的女性生殖系統的良性腫瘤，由子宮平滑肌細胞增生而成，也包含少量結締組織纖維，在我國近年來呈逐步上升的發病趨勢，研究統計資料顯示40~50歲發病人群居多，約為52.2% ~60.0%，因2/3的患者可沒有明顯癥狀，少數臨床表現為陰道出血、腹部可觸及腫物以及壓迫癥狀等，臨床的統計遠遠低于實際患病率人數。子宮肌瘤的發病機制尚不明確，目前研究認為在子宮肌瘤生長過程中，依賴激素水平，雌激素和孕激素作為子宮肌瘤生長的啟動元件，主要為誘導轉錄、合成調節、分化蛋白質，在某些生長因子介導下促進平滑肌細胞的有絲分裂活性，這一作用主要通過雌激素和孕激素通過靶器官內雌激素受體(estrogen receptor，ER)和孕激素受體(progesterone receptors，PR)起作用，富半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich 61，CYR61)具有明顯的促進細胞有絲分裂活性和趨化性，廣泛存在于人體多個器官和組織中，其眾多生物學特性在腫瘤生長中有重要作用，對CYR61的研究有助于發現子宮肌瘤的發病機理。本研究旨在通過檢測CYR61、ER、PR在子宮全切標本肌瘤組織中的表達并與非瘤平滑肌正常組織對比，及三者之間表達上的關系，探討三者與子宮肌瘤發生的關系，為臨床病因提供一定科學依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇筆者所在醫院2011年9月 2012年3月收治子宮肌瘤并行切除術的45例患者，年齡38~51歲，平均(44.7±2.5)歲，月經規律，均為未絕經婦女，術前6個月未服用任何類固醇激素類藥物，無其他疾病史，不伴有其他子宮良、惡性腫瘤，無其他內分泌綜合征。腫瘤直徑0.5~6.8 cm，主要以單發子宮肌瘤為多數，極少數為多發性子宮肌瘤。取材術后經病理檢驗后證實額子宮肌瘤直徑3~5 cm，對照組取材同病例距子宮肌瘤5 em以上的正常子宮平滑肌組織。

1.2 方法

1.2.1 取材 患者術后子宮標本一經離體，馬上取大小各一份約1.0 cm×1.0 cm×0.5 cm子宮肌瘤中心部位及距肌瘤外5 cm的正常平滑肌組織，經10%多聚甲醛溶液中固定48 h后，常規脫水后石蠟包埋，4 μm厚連續切片備用，進行免疫組織化學(SABC)法染色。

1.2.2 CYR61蛋白表達及ER、PR檢測 所有蠟塊同時進行HE染色病例證實為子宮平滑肌瘤和子宮平滑肌組織，根據免疫組織化學法檢測，CYR61供作液稀釋度為1：100，ER、PR為即用型原液，PBS為陰性對照，ER、PR的陽性對照為已知染色陽性的乳腺癌組織，CYR61的陽性對照為染色陽性大腸癌組織。檢測CYR61、ER、PR在正常子宮肌層中的表達。鏈霉素抗生物素-過氧化物酶復合物(SABC復合物)，按試劑盒(ER11302611，PR1130001，北京中山生物試劑有限公司)說明書操作。除去PBS液，滴加新鮮配置的DAB顯色溶液，顯微鏡現觀察3 min。

1.3 判定標準

光學顯微鏡(Olympus)下觀察三組細胞樣本的陽性情況，CYR61受體的陽性棕黃色顆粒主要位于胞漿內，ER、PR的陽性棕黃色顆粒主要位于細胞核內，綜合染色強度及分布范圍進行半定量處理。結果判定采用免疫組織化學評分(H-score)法，依照染色輕度不同分為4級：細胞漿或細胞核上未染色為0分，棕黃色由淺到深依次列為1、2、3分，滿分為4分，隨機選取5個高倍視野(×400)中進行著色細胞和未著色細胞的數目統計，每個標本計數1 000個細胞，分布范圍評分標準：陽性細胞＜10%計為0分；10%~30%為1分；31%~60%為2分，>60%為3分；上述兩種評分相加：(-)0~1分；(+)2分；(++)3~4分；(+++)5~6分。陽性率=(陽性例數/總例數)×100% 。

1.4 統計學處理

采用SPSS 15.0統計學軟件對數據分析，兩組等級資料采用Wann-whitney檢驗進行比較，采用Spearman進行等級相關性分析，P＜0.05為差異有統計學意義，P＜0.01為差異有顯著統計學意義。

2 結果

依據CYR61受體的陽性棕黃色顆粒主要位于胞漿內，ER、PR的陽性棕黃色顆粒主要位于細胞核內，陽性表達強弱依次為：(+++)強陽性，(++)陽性，(+)弱陽性，(-)陰性。分別將實驗組CYR61、ER、PR在宮肌瘤和相應肌層的表達陽性率與對照組對比得出：ER在實驗組陽性率明顯高于對照組，差異有顯著統計學意義(P＜ 0.01)，見表1。PR在實驗組陽性率明顯高于對照組，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)，見表2。CYR61在實驗組陽性率明顯低于對照組，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)，見表3。

3 討論

近年來，隨著分子生物學研究的發展，許多相關研究指出，子宮肌瘤的發生于遺傳因素有關，細胞遺傳學顯示20%~50% 的子宮肌瘤存在遺傳異常，分子生物學研究顯示子宮肌瘤由單克隆平滑肌細胞增殖而成，多發性子宮肌瘤由不同克隆細胞形成。近年來各國臨床上對雌、孕激素與子宮肌瘤生長之間的關系研究不斷深入，提示子宮肌瘤是激素水平依賴性腫瘤，需要兩種激素共同協同作用生長，雌激素首先與ER受體結合，誘導肌瘤細胞表皮生長因子EGF-R的表達，促進PCNA表達；孕激素也同樣先與PR結合，誘導肌瘤細胞產生大量上皮生長因子EGF樣蛋白，促進細胞增殖。CYR61是CCN基因家族中最新發現的一員，家族成員結構相似，均含有富半胱氨酸，編碼CYR61蛋白，利用自身明顯促細胞分裂活性的特征，通過促進細胞生長、血管形成和維持腫瘤體供血來影響腫瘤的發生于發展。CYR61基因與細胞間的通訊有密切關系，人類的CYR61基因表達下調可能是腫瘤發生的一個重要原因。

本研究結果顯示，45例實驗患者的子宮肌瘤中ER和PR的水平均顯著高于對照組(P＜0.01)，ER在子宮肌瘤和相應肌層的表達陽性率高達95.56%，PR在子宮肌瘤和相應肌層的表達陽性率高達97.78%，符合包玲燕等的報道結果。PR的表達高于ER，當子宮肌瘤細胞內ER異常性增多時可顯著增加子宮肌瘤組織對雌激素的親和力，肌瘤細胞顯著增生，臨床上的抗激素藥物通過與ER配體結合區結合后阻止雌激素的這種作用，最終達到治療的目的。測得子宮肌瘤組織中ER和PR表達說明良性子宮肌瘤相當完整保留了正常子宮肌瘤組織中ER和PR的特性，子宮肌瘤的發生發展與雌孕激素水平關系密切。本研究中CYR61在子宮肌瘤和相應肌層中都有表達，但其在正常子宮肌瘤組織中的表達高于在肌瘤組織中的表達，但陽性率程度明顯低于ER和PR的水平，提示CYR61可能與子宮肌瘤發病有關，肌瘤組織中的陽性率的減弱，可能是其通過抑制肌瘤細胞凋亡，促進細胞過度增殖。本研究中，子宮肌細胞和肌瘤細胞中CYR61的表達與ER、PR之間的相關陛不明確，及細胞內的早期雌激素可以上調CYR61的表達，但本研究的標本不區分增殖期和分泌期，因而未檢測到三者之間的調節作用關系。

子宮肌瘤的發病是多因素的，目前的臨床治療主要以手術切除為主，藥物治療因副作用大、停藥后復發率高而受限，通過對CYR61、ER和PR在子宮肌瘤組織和正常平滑肌組織中表達水平及三者間相互作用的研究，為病情的發展發生提供科學依據，更好地預防子宮肌瘤的發生，對患者術后處理提供一定幫助，為應用新方法治療和控制病情發展展示新的思路。

(賈婉秋，富半胱氨酸蛋白61與雌激素受體、孕激素受體在子宮肌瘤中的表達差異[J]中國醫藥科學2012年7月第2卷第13期：35、36、40)

TAG：子宮肌瘤 富半胱氨酸蛋白61 雌激素受體 孕激素受體