人類白癜風(fēng)是一種頑固性皮膚病，病因尚不清楚，發(fā)病機(jī)制至少涉及4種學(xué)說，即自身免疫、神經(jīng)體液因素、自身細(xì)胞毒和接觸外源性物質(zhì)等。近年來普遍認(rèn)為自身免疫學(xué)說是白癜風(fēng)的主要發(fā)生機(jī)制。驅(qū)蟲斑鳩菊(Vw)注射液自新疆特有菊科植物驅(qū)蟲斑鳩菊的種子中提取，主要成分黃酮含量為3g／L。多年臨床應(yīng)用顯示，該藥對(duì)白癜風(fēng)具有明顯的治療效果。考慮到該藥治療白癜風(fēng)可能與機(jī)體免疫系統(tǒng)有關(guān)，我們著重研究了該藥對(duì)正常小鼠免疫系統(tǒng)、酪氨酸酶的合成及其mRNA表達(dá)的影響，以探討其作用機(jī)制，為在臨床上廣泛應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

 

1 材料和方法

1.1 材料

BALB／c小鼠，雌性，6-8周齡，購于中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所。VW 生藥0．25 g／mL，由新疆自治區(qū)人民醫(yī)院臨床藥學(xué)研究所提供。[³H]—TdR為中國原子能研究院產(chǎn)品。酪氨酸酶(6850 U／mg)為瑞典BIOCHEMIKA公司產(chǎn)品。TRIzol試劑盒為美國Gibco BRL公司產(chǎn)品。AccessRT—PCR試劑盒為美國Promega公司產(chǎn)品。熒光抗體為FITC一抗小鼠CD19，為BD公司產(chǎn)品。其余試劑均為進(jìn)口或國產(chǎn)分析純。E960酶聯(lián)免疫測定儀為德國生產(chǎn)；PCR 擴(kuò)增儀為Perkin-Elmer GeneAmp PCR Sys—tem 2400型；FACS Calibur流式細(xì)胞儀為BD公司產(chǎn)品。

 

1.2 實(shí)驗(yàn)分組與給藥

按VW 劑量的不同，將BALB／c小鼠隨機(jī)分成4組，每日給藥量為：低劑量(vw-L)組87.5 mg／kg(為臨床用量的5倍)、中劑量(vw-M)組175 mg／kg(為臨床用量的10倍)、高劑量(vw-H)組350 mg／kg(為臨床用量的20倍)。用藥均在臨用前用生理鹽水配制；正常對(duì)照組注射等劑量生理鹽水，每組10只，每天給藥1次，腹腔注射，每次0.5 mL，共10次。

 

2 結(jié)果

2.1 VW對(duì)小鼠脾細(xì)胞增殖的影響

小鼠給藥10 d后，無菌取脾臟并測定T、B細(xì)胞的活性。與對(duì)照組相比，VW-L、VW-M、VW-H 3個(gè)劑量組均可明顯抑制小鼠脾臟T、B細(xì)胞的增殖(P<0 01，圖1略)，而且具有一定的量效關(guān)系。

 

2.2 VW 對(duì)SRBC致敏小鼠抗體生成細(xì)胞的影響

SRBC致敏小鼠抗體生成反應(yīng)結(jié)果表明，VW—L、VW—M、vW—H 3個(gè)劑量組的D5 值分別是0．59±0．01、0．53+0．01、0．54+0．02，均明顯低于空白對(duì)照組的0．67+0．02(P<0．01)，而且具有一定的量效關(guān)系，說明該藥可抑制小鼠血清抗體的產(chǎn)生。

 

2-3 VW 對(duì)B細(xì)胞標(biāo)志物CD19表達(dá)的影響

    小鼠給藥10 d后取脾淋巴細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀測定B細(xì)胞上表面標(biāo)志物CD19的表達(dá)。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，VW-L、VW-M、VW-H組對(duì)B細(xì)胞表面標(biāo)志物CD19的表達(dá)均有明顯的抑制作用(P<0.01)，而且具有一定的量效關(guān)系，表明VW 對(duì)體液免疫功能具有抑制作用。

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