類風濕關節炎自身抗體的研究進展

來源：百濟藥房藥訊作者：百濟動態瀏覽：發布時間：2010/5/13 3:16:00

類風濕性關節炎(Rheumatoidarthritis，RA)是一種常見的系統性自身免疫性疾病，RA的基本病理改變是關節滑膜的慢性炎癥，增生形成血管翳，侵犯關節軟骨、軟骨下骨、韌帶、肌腱等，造成骨吸收、骨破壞和骨纖維化，最終導致關節畸形和功能喪失。RA的診斷主要依靠臨床表現、自身抗體的檢測和影像學檢查，但早期的RA患者臨床癥狀常不典型，類風濕因子特異性相對較低，X線表現多發生在關節受損之后，多因診斷困難而延誤最佳治療時機，因此尋找特異性自身抗體對RA進行早期診斷已成為近年來RA研究的熱點。本文將對RA自身抗體的研究作一綜述。

1、類風濕因子(RF)

類風濕因子RF是診斷RA最早使用的血清學指標，是針對人或動物IgG分子Fc片斷上抗原決定簇的特異抗體，有IgM—RF、IgG—RF、IgA—RF等類型，但臨床上常檢測的是IgM—RF，它在RA患者中的陽性率可達70％～80％，但其特異性不高。除RA外，RF尚可見于其他的自身免疫性疾病中(如干燥綜合征)，感染性疾病(如慢性肺結核，肝炎)和3％～5％的健康人群中，甚至10％～30％的健康老年人中也可出現。Bas等研究發現，RA患者的臨床表現和骨侵蝕性的損害主要與RF相關，故認為RF對預測疾病嚴重性有價值嘲，Vittecoq等也認為，類風濕因子RF能更好的預測RA患者的影像學進展，雖然RF有相對較低的特異性，但因其檢測方便快速，靈敏度高，同時又是美國風濕病學會診斷類風濕關節炎的分類標準之一，目前仍得到廣泛應用。隱性RF：隱性RF是RF與抗原IgG結合形成的免疫復合物，其中IgM—RF的活性被遮蔽，用常規檢測方法不能檢出，隱性RF在RF陰性的RA患者中陽性率可達37.5％，它在幼年型RA患者中的陽性率較高，可作為RA檢測的補充，有助于提高檢測的敏感性。

2、瓜氨酸相關自身抗體群

2.1 抗瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體) 2000年Schellekens將一條由19個氨基酸殘基組成的肽段合成為環瓜氨酸肽(CCP)，以CCP為抗原用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法在RA患者中檢測到抗CCP抗體，有很好的敏感性和特異性，分別為60％-75％和85％以上，明顯高于RF。抗CCP抗體在RA早期就可出現，并與關節影像學改變密切相關，它的臨床應用將更有助于對早期RA的診斷和治療。國外很多學者研究認為，抗CCP抗體陽性的RA患者骨關節破壞程度較陰性者嚴重，表明抗CCP抗體的檢測對預測RA患者疾病的嚴重性具有重要的應用價值。抗CCP抗體檢測是近年來RA診斷的重大進展，特異性明顯優于RF，并可以與RF互補，提高RA的診斷率。Vencovsky等認為，早期RA骨關節破壞與多種自身抗體密切相關，其中抗CCP抗體和RF是最為敏感的血清學指標，二種抗體的聯合檢測能更好的預測疾病的進展和關節破壞程度。Visser等也發現當抗CCP抗體與RF雙陽性時對關節破壞的預測意義更大。雖然抗CCP抗體在RA的診斷中具有很高的特異性和敏感性，但也有報道認為，抗CCP抗體可能也存在于牛皮癬關節炎患者中。由于CCP可以大量人工合成，試劑穩定，檢測方法簡便快速，結果可靠，因此抗CCP抗體是目前所知的最有希望廣泛應用于RA早期診斷的一種抗體，具有廣泛的臨床應用和研究前景。

2.2 抗角蛋白抗體(AKA) AKA，即抗鼠食道上皮角質層的抗體，對RA診斷具有特異性。AKA與RA病情嚴重程度和活動性有一定關系，在RA的早期甚至臨床癥狀出現之前即可出現，因此它是RA早期診斷和判斷預后的指標之一。有報道稱，AKA陽性的“健康人”幾乎均可發展成典型的RA。研究發現，AKA的靶抗原識別相對分子量為40kD的聚角蛋白微絲(filaggrin)，其成分含有瓜氨酸，可推測抗CCP抗體與AKA應該有很好的重疊性。

2.3 抗核周因子(APF) APF是用人頰粘膜上皮細胞做底物，通過間接免疫熒光法發現的一種RA相關自身抗體，他們存在于49％～91％的RA患者中，其特異性為73％～99％，國內學者研究認為，APF滴度與RA患者病情活動性評價等指標呈正相關。APF可以在疾病早期出現，但其檢出率與病程長短元相關性，陽性往往提示預后欠佳，尤其是RF陰性而APF陽性患者。由于作為APF檢測的抗原片頰粘膜上皮細胞很難獲取和保存，這在一定程度上限制了它的推廣。

2.4 抗聚絲蛋白抗體(AFA) 隨著對APF、AKA的深入研究，人們逐漸發現它們有相同的靶抗原，即上皮細胞分化終末階段的細胞骨架成分聚角蛋白微絲蛋白(filaggrin)，filaggrin的特異性自身抗體即為AFA。通過對滑膜組織的研究發現，AFA由RA患者滑膜組織的漿細胞分泌，因此，AFA可能參與RA的發病，并可能與軟骨和骨的破壞有關。該抗體在滑膜組織中積聚，主要作用于其中的二種蛋白質，即p64—78和p55—61，引起自身免疫反應，參與RA的發病，AFA可在RA的早期甚至臨床癥狀出現之前出現，可作為RA早期診斷的指標，且該類患者病情進展較AFA陰性者快，骨破壞更嚴重。但由于AFA抗原提取多源于正常人乳房形成術切除的皮膚及嬰兒包皮，因而限制了臨床應用。

2.5 抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(抗MCV抗體) 近年來發現的抗MCV抗體對RA具有較高的敏感性和特異性，分別為78％、95％。波形蛋白是重要的細胞骨架蛋白，它在凋亡的巨噬細胞內被瓜氨酸化，從而改變了蛋白結構并增加了潛在的抗原決定簇，波形蛋白在凋亡細胞內因得不到及時清除而持續存在，從而促進了抗MCV抗體的產生。抗MCV抗體因其有多個潛在抗原決定簇而優于抗CCP抗體，同時抗MCV抗體采用ELISA法測定，操作簡便快捷，具有廣泛的臨床應用和研究前景。

2.6 抗Sa抗體 1994年Despres發現抗Sa抗體，該抗體在RA中的敏感性為20％～47％，特異性為95％以上。Sa抗原分子量為48～50kD，是存在于人胎盤、脾和RA患者血管翳的一種非核抗原，有研究發現，抗Sa抗體的靶抗原為瓜氨酸化的波狀蛋白(vimentin)，抗Sa抗體可出現在RA早期并提示預后不良。Gilles等比較了抗Sa抗體，抗CCP抗體和RF對早期多關節炎患者疾病嚴重性的評估，發現抗Sa抗體可獨立作為預示疾病嚴重性的血清學指標，與關節的損害程度密切相關。由于在抗原底物的獲得和保存上存在技術困難，以及試驗結果判斷不易標準化，使得無法推廣應用。

現已有研究證實AFA、APF、AKA、抗CCP抗體、抗Sa抗體和抗MCV抗體在化學結構上具有相關性，均以含瓜氨酸的filaggrin片斷為抗原識別位點，因此有人將上述抗體統稱為瓜氨酸相關自身抗體(anti—eitrullinated protein auto antibodies，AC—PA)，但幾種抗體的檢測結果并不完全重疊，可以互相補充，幾種抗體的聯合檢測可明顯提高RA診斷的敏感性。

3、抗Bip抗體

抗Bip抗體的靶抗原為內質網免疫球蛋白結合蛋白，屬于熱休克蛋白Hsp家族成員，是分布廣泛的分子伴侶，Bip能刺激RA滑液CD8+T細胞增殖并產生IL一10等細胞因子，調節炎癥反應的發生。Bip抗體存在于RA患者的滑液和血清中，有文獻報道，抗Bip抗體在已確診的RA患者中其敏感性和特異性分別為73％和71％，在早期的RA患者中分別為66％和65％，因此抗Bip抗體對RA的早期診斷有很重要的意義。

4、抗RA33抗體

1989年Hassfeld等用免疫印跡法在RA患者的血清中檢測到RA33抗體，它是能與相對分子量為33KD的核酸蛋白產生特異性反應的IgG型自身抗體。現國內外已公認血清抗RA33抗體有助于RA的早期診斷，關于抗RA33抗體在RA患者中的陽性率國內外報道不一，其敏感性在35％～45％，特異性可達90％，抗RA33抗體可出現在早期不典型的RA患者中，但抗RA33抗體不是類風濕性關節炎的特異性抗體，它不僅在RA中出現，在SLE和MCTD等病中也有較低陽性率。

5、抗Ⅱ型膠原抗體

其靶抗原可能來源于關節，并通過介導細胞及體液免疫反應參與關節炎的發生和發展，溴化氰能把各種屬Ⅱ型膠原消化成若干個片斷，有類似的位點特異抗體。RA患者的主要位點特異抗體是CBl0、CBll。Ⅱ型膠原蛋白作為一種與RA相關的抗原，在RA的發病機制中起著重要的作用。Andrew等報道，CBl0可存在于88％的RA患者的血清中，且在早期RA患者中的陽性率高于晚期的RA患者，結合RF、抗CCP抗體的檢測，將有更可靠的預測疾病的價值，同時為我們研究RA的發病機制提供了很大的幫助。

6抗葡萄糖-6-磷酸異構酶抗體(抗GPI抗體)

該抗體是在K／BXN轉基因鼠的關節炎模型中發現的，將這種抗體轉移給健康小鼠可誘導關節炎的發生。抗GPI抗體為關節外抗原致病機制的研究提供了有意義的證據。RA關節液中抗GPI抗體滴度比血清中明顯提高，表明該抗體可能在滑膜組織局部產生，Jouen等報道，在RA患者血清中抗GPI抗體的陽性率約為45.4％，但特異性僅75.0％，且抗體的出現與RA患者預后無關，抗GPI抗體不是RA的特異性抗體，它也可以存在于其他類型關節炎患者中。

7抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST)

鈣蛋白酶是可溶性的鈣依賴半胱氨酸蛋白酶，能夠降解結締組織基質，在RA關節炎癥與骨質破壞中起著重要作用。鈣蛋白酶抑素是特異性的鈣蛋白酶抑制劑，能夠使活化的鈣蛋白酶失活。目前認為鈣蛋白酶一鈣蛋白酶抑素系統參與了類風濕關節炎的發病。有報道認為在RA患者體內可能存在抗鈣蛋白酶抑素自身抗體(anti-bodies toe alpstatin，ACAST)，ACAST與鈣蛋白酶抑素結合，使鈣蛋白酶抑素減少，不能有效的降解鈣蛋白酶，致使鈣蛋白酶在關節中增多，引起關節軟骨基質降解和骨破壞。最近waki—Egawa等用紅細胞鈣蛋白酶抑素作為抗原，用ELISA法檢測ACAST，結果顯示，在RA的敏感性為82.8％，特異性96.1％，故認為ACAST對RA診斷具有很高的價值。

8其他抗體

除上述幾種抗體外，RA患者中也可見其他抗體，抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)在RA早期就可出現，并可預測關節損害程度。抗RA相關核抗原(RANA)抗體可見于65％～95％的RA患者，顯著高于其他結締組織病，且在RF陰性的RA患者中可有38．5％的陽性率。此外，抗磷脂抗體，抗RNP抗體也可出現在RA患者中，但由于缺乏特異性，敏感性較低，所以很少應用于臨床工作中。總之，上述所提到的幾種抗體均有助于對RA的早期診斷，可提高對RA診斷的特異性和敏感性，其中抗CCP抗體是最有希望廣泛應用于RA早期診斷的抗體。隨著第二代抗CCP抗體的出現，其對RA診斷的敏感性和特異性明顯提高，Quinn等報道，第二代抗CCP抗體對早期的RA患者，特別是血清反應陰性的RA患者有很重要的診斷意義。Raza等報道，第二代抗CCP抗體和RF抗體的聯合應用能更好的預測早期滑膜炎RA患者病情的發展及其嚴重性，而幾種抗體的聯合應用，可彌補RF對RA診斷的不足，對提高RA診斷的陽性率、預測RA患者病情的嚴重性都有很重要的應用價值。