本課題組在前期研究已證實，干姜提取物能使心衰兔LVSP、LV±dp/dt max 、LV+dp/dt max 、LV-dp/dt max 呈逐漸上升趨勢，t-dp/dt max 呈逐漸縮短趨勢，LVEDP呈下降趨勢，顯示其改善心肌收縮性能，減輕心衰癥狀的作用，并隨劑量增加而作用增強。由于四逆湯是回陽救逆的傳統名方，有研究證實其具有增加心衰大鼠心輸出量、增強心肌收縮力、較好維持心臟功能的作用，并能提高過氧化物歧化酶（SOD）活性、降低丙二醛（MAD）含量、抗氧化應激、抑制心肌細胞凋亡，從而保護心肌細胞功能 ［1］ 。干姜是四逆湯的臣藥，在四逆湯的臨床療效中起著舉足輕重的作用。為了探討干姜在四逆湯中發揮的內在作用，試從兩者改善心衰兔的心肌舒縮性能的作用異同開展研究。

　　1 材料與儀器

　　1.1 實驗動物 純種新西蘭兔（體重2.3kg±）40只，雌雄各半，隨機分為4組，每組10只，分別為低劑量干姜組、中劑量干姜組、高劑量干姜組和四逆湯組。由廣東省醫學實驗動物中心提供，動物合格證號:省科學技術委員會2002A025，省醫學實驗動物管理委員會26-2003A004。

　　1.2 主要實驗試劑 （1）戊巴比妥鈉（由中國醫藥集團上海化學試劑公司提供，批號F20020915），用生理鹽水配備為3%和2%濃度備用。（2）肝素（由徐州萬邦生化制藥有限公司提供，批號0203107）用生理鹽水配備為125萬U/100ml和125萬U/250ml濃度備用。（3）5%葡萄糖（由廣東大冢制藥有限公司提供，批號030125）。（4）超臨界流體CO 2 萃取的干姜提取物（由廣州美晨藥業有限公司提供，批號200209054）。（5）食用花生油（由中山市鷹嘜食品有限公司提供，產品標準號GB1534-86）。（6）受試品劑量計算、配制及觀察用量:按標準體重動物的等效劑量折算，兔口服干姜提取物的LD 50 為1.689ml/kg，分別取其1/60（0.028ml/kg）、1/30（0.056ml/kg）、1/15（0.112ml/kg）為低、中、高劑量。用食用花生油作溶劑，將干姜提取物稀釋100倍、50倍、25倍，分別配制成1%、2%、4%干姜提取物，配制后的觀察用量均為2.8ml/kg。（7）四逆湯的制備:藥物組成制附子、干姜、炙甘草，均購于廣東省中醫院藥劑科，并經廣州中醫藥大學中藥鑒定教研室李薇教授鑒定，所購藥品均為正品。根據《中國藥典》2000版第一部 ［2］ 規定的比例，分別二次文火煎煮，煎液用水浴法蒸發濃縮為400ml，使其終濃度為0.5g生藥/ml，置4℃冰箱中冷藏備用。根據動物與人體表比換算 ［3］ ，兔口服四逆湯的等效劑量為生藥0.75g/kg，取10倍等效劑量7.5g/kg作為本實驗觀察用量，即四逆湯煎劑用量為15ml/kg。

　　1.3 主要儀器 （1）RM-600四道生理儀（日產光電）;（2）江灣I型微型人工呼吸機（第二軍醫大學生產）;（3）恒速輸液泵（2132microperpex peristaltic）;（4）心導管、輸液管（江蘇無錫市錫山 南泉高分子醫械廠出產）;（5）常規手術器械。

　　2 實驗方法

　　2.1 手術方法 ［4～6］ （1）用3%戊巴比妥鈉對新西蘭兔行左側耳緣靜脈注射麻醉，仰臥固定;（2）分離氣管及左側頸總動脈后，切開左側頸總動脈，插入直徑1mm已充滿肝素（濃度125萬U/250ml）的心導管，心導管經壓力換能器連接四道生理儀，緩緩推進同時觀察示波器，當波型提示導管已進入左心室時停止推進;（3）氣管切開，連接微型人工呼吸機，潮氣量380ml左右，呼吸頻率40次/min左右，并根據動物體重等個體情況調節呼吸頻率和潮氣量。

　　2.2 造模方法 上述手術完畢后，經右側耳緣靜脈留置的輸液管，注入肝素注射液1ml/kg（濃度125萬U/100ml），然后持續滴注5%葡萄糖（滴速20滴/min）;穩定10min后，記錄各項指標的造模前基礎值;用輸液泵經上述留置的輸液管，恒速輸入2%戊巴比妥鈉，先以0.15ml·kg -1 ·min -1 的滴速，密切觀察各指標的變化，當LV±dp/dt max 下降到基礎值的20%左右，暫停滴入，穩定觀察10min，觀察過程若出現 LV±dp/dt max 回升者，再以0.1ml·kg -1 ·min -1 恒速給予維持量。

　　2.3 給藥途徑及用量 經口插管入胃，于造模成功并穩定維持10min后，灌服受試品或對照品，并用適量蒸溜水沖管。各組用藥量如下:低劑量干姜組:1%干姜提取物2.8ml/kg;中劑量干姜組:2%干姜提取物2.8ml/kg;高劑量干姜組:4%干姜提取物2.8ml/kg;四逆湯組:四逆湯煎液15ml/kg。

　　2.4 指標的觀察

　　2.4.1 觀察方法 ［4，5］ 四道生理儀定標靈敏度400mmHg/mm，紙速50mm/s，經連接股動脈的壓力換能器測量SAP和DAP;經載波放大器記錄左心室內壓峰值（LVSP），將左室內壓信號經直流放大器放大10倍，測定左室舒張末期壓（LVEDP），將載波放大器的電訊號輸入微分器，測量左心室內壓變化速率最大值（LV±dp/dt max ）;測定心率（HR）并描記變化曲線;記錄II導ECG，根據心電R波峰判斷心室開始收縮的標志至dp/dt max 的間隔時間（t-dp/dt max ）;從血壓收縮波起始點至舒張波起點測量心室射血時間（LVET） ［7］ 。

　　2.4.2 觀察指標 造模前記錄基礎值，造模成功并穩定10min后記錄藥前值，給藥后分別記錄藥后5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min、90min、120min、150min以下各指標。（1）左心室內壓峰值（LVSP）;（2）左室舒張末期壓（LVEDP）;（3）左心室內壓變化速率最大值（LV±dp/dt max ）;（4）左心室內壓上升速率最大值（LV+dp/dt max ）;（5）左心室內壓下降速率最大值（LV-dp/dt max ）;（6）Ⅱ導ECG，根據心電R波峰判斷心室開始收縮的標志至dp/dt max 的間隔時間（t-dp/dt max ）;（7）心室射血時間（LVET）:從血壓收縮波起始點至舒張波起點的間隔時間。

　　3 數據處理

　　使用SPSS10.0統計軟件包進行數據處理和統計分析:（1）各組自身比較:各組藥前后自身比較采用配對t檢驗。（2）組間比較:以［（各時點實測值-藥前值）/藥前值×100%］計算各指標的變化率。采用單因素方差分析（One-Way ANOVA），方差齊性者選擇最小顯著差異法檢驗（LSD檢驗）;方差不齊者選擇Dunnett t 3 法進行檢驗。

　　4 實驗結果

　　結果見表1、表2、表3。結果表明，干姜提取物和四逆湯對心衰兔心肌舒縮性能的共同作用表現在幾方面:（1）使心衰動物模型的LVSP、LV±dp/dt max 、LV+dp/dt max 均呈逐漸上升趨勢，同時使t-dp/dt max和LVET呈逐漸縮短趨勢，顯示其增強心肌收縮性能的作用;（2）使心衰動物模型的LV±dp/dt max 、LV-dp/dt max 呈逐漸上升趨勢，顯示增強心肌舒張性能的作用;（3）使心衰動物模型的t-dp/dt max 呈逐漸縮短趨勢，顯示其降低外周阻力，減輕心臟后負荷的作用。通過以上幾方面的綜合作用，改善心衰兔的心臟功能，但其作用程度存在一定的差異。

　　干姜提取物和四逆湯對心衰兔心肌舒縮性能的作用差異表現在幾方面:（1）四逆湯組與各劑量干姜組的t-dp/dt max 和LVET的變化率組間差異無顯著性;（2）就LVSP而言，四逆湯組藥后120min時與高劑量干姜組之間，藥后150min時與中劑量干姜組之間，差異有顯著性或差異有非常顯著性，P<0.05或P<0.01;（3）就LV±dp/dt max 而言，四逆湯組與高劑量干姜組在藥后30～150min各時點均有差異，45min、60min、150min差異有非常顯著性，P<0.01，90～120min差異有非常顯著性，P<0.001;（4）就LV+dp/dt max 而言，四逆湯組與高劑量干姜組在藥后90～150min各時點差異均有顯著性，P<0.05;（5）就LV-dp/dt max 而言，四逆湯組與中劑量干姜組在藥后30～150min各時點差異均有顯著性，90min時差異有非常顯著性，P<0.01，與高劑量干姜組在藥后30～150min各時點均有差異，30min和150min時 差異有非常顯著性，P<0.01，45～120min各時點差異有非常顯著性，P<0.001。（6）四逆湯組藥后各時點LVEDP與藥前值比較均未見差異，而各劑量干姜組藥后各時點LVEDP呈下降趨勢，尤以高劑量組下降趨勢明顯，在藥后10～150min各時點，與藥前值比較差異有非常顯著性，P<0.001。

　　5 結論

　　（1）中、高劑量干姜組，尤其是高劑量干姜組提高LVSP、LV±dp/dt max 、LV+dp/dt max 和LV-dp/dt max 的幅度明顯比四逆湯組大，具有較強的增強心肌收縮和舒張性能的作用。（2）高劑量干姜組在降低LVEDP有獨特優勢，能減輕心臟前負荷，改善室壁張力和舒張末期容積，增強心肌舒張性能。

　　6 討論

　　干姜是四逆湯的臣藥，在四逆湯的臨床療效中起著舉足輕重的作用，四逆湯中單用附子，強心作用既不明顯，也不持久，且毒性很大;若與干姜、甘草配伍，即強心、升壓作用顯著而持久。歷代均有“附子無干姜不熱，得甘草則緩”的說法。本實驗研究的結果提示四逆湯和干姜提取物均具有增強心衰兔心臟功能的作用，共同表現為增強心肌收縮和舒張性能、降低外周阻力、減輕心臟后負荷，而以干姜提取物的作用更強，差異具有非常顯著性。同時干姜提取物還在改善心率、降低舒張末期壓具有優勢，更有利于冠脈灌流，減輕心臟前負荷，改善室壁張力和舒張末期容積，增強心肌舒張性能。

　　由于四逆湯中的附子毒性較大，有研究表明，熟附片煎劑灌胃，可引起兔心率變慢、傳導阻滯、室性期外收縮、室性心動過速，最后死于心室顫動，并可見呼吸困難、瞳孔縮小、 分泌物增多、大小便增多，一般于2～3h內死亡 ［8］ 。雖然通過配伍干姜和甘草，能使毒性明顯減輕，但如果長期服用，難免有毒性積蓄的弊端。探討傳統古方的有效成分，在保留原方基本功效的前提下，簡化藥物組成，開發藥物新劑型，可能是中藥現代化的發展方向。干姜在四逆湯所發揮的內在作用是什么?其有效成分是否是四逆湯心血管藥理作用的物質基礎之一?單用干姜和使用四逆湯復方各有什么優勢和弊端?值得進一步深入研究。（參考來源：干姜提取物和四逆湯對心衰兔心臟舒縮性能的作用比較，盧傳堅，中華中西醫雜志2004年第5卷第14期）

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