1 影響免疫器官的生長發(fā)育
免疫器官是淋巴細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞發(fā)生,分化,成熟,定居和增殖及動(dòng)物產(chǎn)生免疫反應(yīng)的主要場所,它們的發(fā)育狀況直接影響到機(jī)體免疫力的高低。對動(dòng)物免疫器官的影響主要體現(xiàn)在其對胸腺、脾臟、淋巴結(jié)和腔上囊重量的影響。研究表明,天地欣(香菇多糖)可使正常小鼠以及免疫抑制小鼠免疫器官脾臟及胸腺重量顯著增加(P<0.05)(趙美英等,2000;蘆殿榮,2004;榮微,2006)。能使胸腺剛狀內(nèi)皮細(xì)胞增生,體積增大,細(xì)胞漿中線粒體數(shù)量增多,體積增大:脾臟中漿細(xì)胞數(shù)目增多,以成熟漿細(xì)胞為主,漿細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張呈管泡狀或環(huán)形,腔內(nèi)光電子密度降低,充滿合成的抗體蛋白顆粒(白潤江等,1997)。
2 延緩衰老,抗氧化作用
自由基是指任何能獨(dú)立存在含有一個(gè)或更多不能配對電子的原子或基因。正常狀態(tài)下自由基能通過破壞細(xì)胞膜而引起病變并累積這種病變。通常情況下,針對代謝中自由基的產(chǎn)生,機(jī)體形成一套抗氧化系統(tǒng),使自由基的產(chǎn)生和清除處于平衡狀態(tài)如,SOD、GSH-Px。
研究表明,天地欣(香菇多糖)能提高肝臟GSH-Px活性,降低力竭游泳后肝臟MDA及血清GPT活性,起到抗氧化、抗損傷等保肝作用。明顯提高肝糖元的水平和運(yùn)動(dòng)能力。使膈肌組織內(nèi)SOD活性升高,NOS活性、NO及MDA含量明顯降低。從而減輕膈肌線粒體自由基損傷,改善了線粒體呼吸鏈的正常功能,促進(jìn)ATP合成,加強(qiáng)膈肌能量供應(yīng)(史亞麗等,2004;徐敏等,2006)。黃國城(1995)報(bào)道,天地欣(香菇多糖)劑量1%能使果蠅平均壽命延長21.50%和11.24%,同時(shí)天地欣能使巨噬細(xì)胞內(nèi)MDA含量下降,SOD及GSH-Px活性增高,提示巨噬細(xì)胞抗脂質(zhì)過氧化作用增強(qiáng)(陳三等,2003)。
3 對細(xì)胞因子的影響
細(xì)胞因子是由活化的免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌的、介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫,炎癥反應(yīng)的小分子多肽,是一類非特異性免疫效應(yīng)物質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn),它能促進(jìn)佛波酯和卡西霉素A協(xié)同誘導(dǎo)的血淋巴細(xì)胞分泌的IL-2與其受體表達(dá)。ConA誘導(dǎo)脾T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)與IL-2、IL-1分泌(劉永杰等,1999)。在注射INT后,發(fā)現(xiàn)IFN和SOD的mRNA量也明顯高于未注射天地欣的荷瘤小鼠。兩組劑量5mg/kg、30mg/kg相比,前者的作用好于后者,說明天地欣對小鼠IFN和SOD基因的表達(dá)可能與活性水平一樣存在著濃度依賴性的雙向調(diào)節(jié)作用(梅兵等,2001)。
天地欣(香菇多糖)還能激活補(bǔ)體系統(tǒng),促進(jìn)抗體形成,使巨噬細(xì)胞溶酶體酶和IL-1分泌量增加,而抑制巨噬細(xì)胞釋放PGE、PGF。天地欣(香菇多糖)能促進(jìn)IL-1、IL-2、IL-3、IFN和TNF等細(xì)胞因子的生成。可上調(diào)腫瘤患者血漿IL-2、IL-12等細(xì)胞因子水平,下調(diào)IL-4等細(xì)胞因子水平(李廣宙等,2000;Yoshino,2000)。
4 對淋巴細(xì)胞的影響
T淋巴細(xì)胞(TLc)經(jīng)抗原或絲裂原刺激后產(chǎn)生應(yīng)答性增殖反應(yīng),是其發(fā)揮生物效應(yīng)的重要環(huán)節(jié)。抑制該環(huán)節(jié),即可抑制TLc的免疫作用。天地欣能較好地拮抗A549細(xì)胞ISF對TLc增殖的抑制(董浦江等,2000)。徐慶樂等(2002)研究發(fā)現(xiàn),復(fù)合多糖(香菇多糖,銀耳多糖組成)各劑量均可提高荷瘤小鼠的T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能,其中0.75g/kg組SI值明顯高于蒸餾水對照組(P<0.05)。
Hamuro等發(fā)現(xiàn)INT和IL-2聯(lián)合抗肺轉(zhuǎn)移瘤的作用可以被CD8+、CD4+抗血清所阻斷,說明其抗腫瘤作用主要是由于抗原特異區(qū)CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞所介導(dǎo)的。Gomella等證實(shí)HLA-DR+細(xì)胞主要為激活的CD8細(xì)胞,進(jìn)而影響CIM/CD8比值。
Takeshita等報(bào)道,給胃癌術(shù)前應(yīng)用天地欣,可明顯提高淋巴結(jié)中CD4+,Til,Leuil及Leu M3的細(xì)胞數(shù)目。天地欣是一種胸腺依賴型T細(xì)胞導(dǎo)向并有巨噬細(xì)胞參與的免疫佐劑。其免疫作用特點(diǎn)在于識(shí)別脾及肝中抗原的巨噬細(xì)胞,促進(jìn)淋巴細(xì)胞活化因子(LAE)的產(chǎn)生,釋放各種輔助性T細(xì)胞因子。井歡(2003)在給脾虛模型小鼠組灌胃天地欣(200mg/kg)7天后,其CD4+ T細(xì)胞和CD8+ T細(xì)胞數(shù)量均可接近正常水平。
5 對巨噬細(xì)胞的影響
巨噬細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)中的重要成分之一,作為免疫效應(yīng)細(xì)胞起作用,廣泛參與免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。動(dòng)物體內(nèi)抗微生物和寄生蟲感染的主要效應(yīng)細(xì)胞是巨噬細(xì)胞,具有iNOS參與的NO產(chǎn)生途徑。使用LTN后,大多數(shù)由巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的各種類型的生物活性血清因子會(huì)立刻出現(xiàn),如IL-1、IL-3等,導(dǎo)致與免疫和炎癥有關(guān)的許多宿主防衛(wèi)反應(yīng)的產(chǎn)生。這些因子影響iNOS活性和NO生成。
LTN能刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞活化并使iNOS活性增加,釋放大量NO(丁航等,2003)。陳國榮等(1996)報(bào)道了天地欣能使大鼠腹腔區(qū)巨噬細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸、精氨酸酶、乳酸脫氫酶活性及吞噬中性紅功能增強(qiáng)。天地欣(香菇多糖)在體內(nèi)可使腹腔巨噬細(xì)胞擴(kuò)增、活化,并可誘導(dǎo)殺傷性巨噬細(xì)胞和抗體依存性巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。給荷瘤小鼠應(yīng)用天地欣(香菇多糖)后,巨噬細(xì)胞對MAF的反應(yīng)性顯著增強(qiáng),抑瘤活性達(dá)74.6%(Hamuro J et al,1984)。
研究發(fā)現(xiàn):在注射天地欣(香菇多糖)幾個(gè)小時(shí)后,許多生物活性血清因子的水平達(dá)到峰值,繼而血漿中出現(xiàn)血紅蛋白結(jié)合蛋白、血紅素結(jié)合蛋白和血漿酮蘭蛋白。這種作用可能是由于天地欣(香菇多糖)首先刺激巨噬細(xì)胞分泌急性期蛋白誘導(dǎo)因子來實(shí)現(xiàn)的。
6 對體液免疫的影響
體液免疫是由B細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答,通過抗體發(fā)揮效應(yīng),其目標(biāo)主要是清除細(xì)胞外的病原菌及其產(chǎn)生的毒素等抗原異物。溶血素水平反映體液免疫能力,小鼠接受外來抗原(SRBC)時(shí),B淋巴細(xì)胞在SRBC刺激下分化形成漿細(xì)胞,漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體-溶血素,并釋放到外周血。
一定量的抗體與SRBC特異性結(jié)合,使一定量SRBC溶血,釋放出細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白。半數(shù)溶血值HCso值反映了機(jī)體的抗體產(chǎn)生水平,溶血素的含量與機(jī)體體液免疫能力呈正相關(guān)。天地欣的免疫效應(yīng)與其劑量有關(guān),在一定計(jì)量范圍內(nèi)可以增高正常小鼠綿羊紅細(xì)胞定量溶血素測定QHS值,顯著提高環(huán)磷酰胺(cy)誘導(dǎo)的免疫功能低下的小鼠脾細(xì)胞溶血素抗體(IgM)生成(周愛武等,1995;梁煥英等,1991)。可顯著提高繼發(fā)性免疫功能低下小鼠的溶血空斑形成細(xì)胞數(shù)(P<0.001)(曲章義等,2001)。對S180荷瘤小鼠的溶血素值(CH50)有一定的提高作用。同時(shí)能顯著增加血清中凝集素的含量。
7 抗腫瘤作用
天地欣(香菇多糖)對動(dòng)物腫瘤的增殖有明顯的抑制作用,可促進(jìn)T細(xì)胞的增殖和IL-2的分布,提高T細(xì)胞和NK細(xì)胞的免疫活性,增加LAK細(xì)胞的產(chǎn)生,能激活腫瘤壞死因子的產(chǎn)生。能明顯促進(jìn)淋巴細(xì)胞激活因子(CAF)的產(chǎn)生,促進(jìn)IL-2的生成和未成熟T淋巴細(xì)胞向成熟分化,在體內(nèi)外均可提高輔助性T淋巴細(xì)胞(TH)的活性和CTL的活性。
在巨噬細(xì)胞參與下使低下的免疫功能恢復(fù)正常,是巨噬細(xì)胞參與的T淋巴細(xì)胞增強(qiáng)劑。王慧銘等(2006)研究發(fā)現(xiàn),天地欣(香菇多糖)能明顯減小S180荷瘤小鼠的瘤重和瘤體比(P<0.05),明顯抑制腫瘤的生長(P<0.05),低、中、高劑量組的平均抑瘤率分別為37%、46%、49%;明顯增強(qiáng)S180荷瘤小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能(P<0.05);明顯提高S180荷瘤小鼠脾細(xì)胞的轉(zhuǎn)化功能和NK細(xì)胞的活性(P<0.05)。
卯曉嵐(1989)也報(bào)道,天地欣(香菇多糖)可使帶瘤而降低的輔助T細(xì)胞功能得到恢復(fù),增強(qiáng)機(jī)體的免疫力,間接抑制腫瘤,它還能活化巨噬細(xì)胞。降低甲基膽蒽誘發(fā)腫瘤的生長率(Hamuro J,2004)。天地欣(香菇多糖)對不同品種,不同品系的動(dòng)物的抑瘤效果有關(guān)。Chihara et al(1970)研究表明,天地欣(香菇多糖)對瑞士ICR/JCL系小鼠體內(nèi)S180內(nèi)瘤的抑制率達(dá)100%,在10只實(shí)驗(yàn)小鼠中有9-10只小鼠的腫瘤完全消退,而對C.H/He系小鼠體內(nèi)S180內(nèi)瘤的抑制率僅為34-36%,10只實(shí)驗(yàn)小鼠中腫瘤完全消退的小鼠數(shù)為零。
8 抗感染作用
天地欣(香菇多糖)通過提高巨噬細(xì)胞功能延長李司忒氏菌感染小鼠的生存期。在肺和肝上寄生、增殖、生長的曼氏裂體吸蟲和日本血吸蟲蟲卵的周圍,天地欣(香菇多糖)能增強(qiáng)肉芽腫的形成,給藥組是對照組的8倍,并使中心部壞死。天地欣(香菇多糖)對利曼氏等原蟲也有作用(Byram,1978;Cook,1982)。
給予小鼠LD70和LD100流感病毒,在小鼠感染流感病毒前24小時(shí)給予天地欣(香菇多糖)滴鼻或靜注,顯著延長感染LD100流感病毒小鼠的生存期,降低了感染LD75流感病毒小鼠的發(fā)病率,抑制了流感病毒的體內(nèi)復(fù)制,呼吸道巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-6和NO的活性升高(1rinoda,1992)。天地欣(香菇多糖)的抗病毒作用與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。
Yeshida(1989)發(fā)現(xiàn),硫酸化成為硫酸天地欣(香菇多糖)或當(dāng)其與疊氮胸苷并用之后,表現(xiàn)了顯著抑制HIV的復(fù)制功能,但硫酸天地欣(香菇多糖)失去了其抗腫瘤活性,而天然的天地欣(香菇多糖)通過宿主介導(dǎo),有較強(qiáng)的抗腫瘤活性,但其抗病毒作用較低。AA肉雞在感染vAMV,vMDV的給予天地欣(香菇多糖),均可降低AMB和MD的發(fā)病率和死亡率,心臟、肝臟和腎臟則見Se-GSHPx活性顯著增強(qiáng)(P<0.05)。
9 對信息物質(zhì)的影響
大多數(shù)細(xì)胞外信息物質(zhì)不能進(jìn)入胞內(nèi),而是作用于細(xì)胞膜的靶位,引起細(xì)胞膜的一系列變化,產(chǎn)生信息分子即第二信使。而第二信使可將胞外信息傳導(dǎo),放大,變?yōu)榘麅?nèi)信息傳遞,擴(kuò)布,最終調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。公認(rèn)的第二信使有cAMP,cGMP,IP3,Ca2+,NO等。天地欣(香菇多糖)能顯著提高脾淋巴細(xì)胞免疫功能。其作用是通過改變細(xì)胞內(nèi)信息傳導(dǎo)實(shí)現(xiàn)的。
陳洪亮(2002)研究表明,天地欣(香菇多糖)能劑量依賴性促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率及細(xì)胞內(nèi)NO、Ca2+濃度,當(dāng)作用時(shí)間為20min時(shí),能增加cAMP和cGMP濃度,而當(dāng)作用時(shí)間為60min,則對cAMP和cGMP濃度無顯著影響。天地欣(香菇多糖)能增加小鼠血漿、脾臟及胸腺cGMP含量(P<0.05);降低胸腺及脾臟cAMP含量(P<0.05)(白潤江等,1997)。