臨床研究成藥羅補甫克比日(丸)中人體必需微量元素和蛋白質的含量

來源：百濟新特藥房網發布時間：2011-7-18 16:28:47

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    維吾爾醫成藥羅補甫克比日丸是一味傳統維吾爾醫藥，為黑色、氣香、味微苦的小蜜丸，是白皮松子、胡蘿卜子、牛鞭、巴旦仁、蕪青子、奶桃、西紅花、肉豆蔻衣、鐵力木、洋蔥子、苜蓿子、葉補血草、青蘿卜子、蔓菁子、黃瓜子、罌粟子、肉桂、麝香、高良姜、乳香、玉竹、白芨、姜等50味維吾爾藥材組成的復合醫藥。是西域、中亞、西亞一帶的名老維醫中溫補腦腎、益心填精的主要配方，是廣泛用于陽痿、抑郁、滑精、早泄、體虛、消瘦、神經衰弱等病的“藥王”。但對羅補甫克比日丸中微量元素和蛋白質含量的測定未見報道，為發掘我區民族醫藥，本文對羅補甫克比日丸中人體必需的微量元素和蛋白質進行了測定及分析。

　 1 材料與儀器
　 1.1 材料維吾爾醫成藥羅補甫克比日丸自新疆和田地區維吾爾醫院制藥廠購買。

    1.2 試劑與儀器牛血清白蛋白（上海化學試劑采購供應站），電泳純；硫酸銅，GR；酒石酸鉀鈉，GR；氫氧化鈉，GR；標準品蘆丁（上海化學試劑公司），BR；HNO3，GB；HCl，GB；11種元素的系列標準溶液，均有標準儲備溶液稀釋而得。測定與分析用水均為超純水。

　 754紫外分光光度計（上海儀器分析廠）；日立-518型原子吸收光譜儀。

　 2 蛋白質含量的測定

　 2.1 蛋白質的定性稱取樣品適量，用蒸餾水浸泡12h，過濾，備用。

　 2.1.1 雙縮脲反應取樣品液1ml加10%NaOH液5滴，搖勻，再逐滴加入1%CuSO4溶液2滴再搖動，出現藍紫色。

    2.1.2 黃色反應取樣品液1ml，加濃硝酸5滴出現蛋白質沉淀，用微火小心加熱沉淀變成黃色，冷卻后，逐滴加入10%NaOH液，當反應液呈堿性時，顏色由黃色轉變成深橙黃色。

    2.1.3 茚三酮反應取樣品液1ml，加0.5%茚三酮乙醇溶液4滴，在水浴中加熱5min，冷卻，均呈藍紫色。結果表明羅補甫克比日丸含有蛋白質。

    2.2 雙縮脲試劑的制備依次溶解1.5g硫酸銅和6.0g酒石酸鉀鈉于500ml超純水中，在不斷攪拌中加入10%氫氧化鈉300ml，用超純水稀釋1000ml，密閉保存備用。

    2.3 標準牛血清白蛋白的制備溶解牛血清白蛋白于超純水中，配制成濃度為1.0mg/ml、2.0mg/ml、3.0mg/ml、4.0mg/ml、5.0mg/ml，用分光光度計校正其正確濃度（A1%280=6.60）。

    2.4 樣品（羅補甫克比日丸）的制備用電子分析天平稱取羅補甫克比日丸2.0001g，研磨，加稀鹽40ml，浸泡24h，過濾，把濾液轉移至50ml容量瓶中稀釋刻度，保存備用。

    2.5 標準曲線吸取不同濃度（1～5mg/ml）的標準牛血清白蛋白溶液各1.0ml加入雙縮脲試劑4.0ml，混合均勻，于25℃水浴中保溫30min。然后用分光光度計與波長λ=550nm讀取A（吸光度）值，讀時以1ml超純水加4.0ml雙縮脲試劑為比色空白對照。最后以標準蛋白質濃度Ｃ為橫坐標，以吸光度Ａ為縱坐標，繪制標準曲線，用最小二乘法經線性回歸，蛋白質濃度（C）與吸光度（Ａ）的關系曲線的回歸方程式: A=0.0867C（0.102667=0.0867C），相關系數為R2=0.993，所以本實驗檢測方法中蛋白質濃度與吸光度有良好的相關性。

　 2.6 計算羅補甫克比日丸中蛋白質含量用上述同樣方法，測得樣品中的A550，然后在標準曲線上查得樣品中蛋白質含量為29.6026%。

　 2.7 加樣回收率的測定取標準樣溶液，加牛血清白蛋白0.3mg，其他步驟與標準曲線制作相同，測定吸光度，平均回收率為95%～103%。

　 3 微量元素的測定
　 3.1 試液制備取藥材樣品適量，用研缽研磨為細粉，上述藥粉，在電子分析天平上準確稱取5.0002g，馬福爐中低溫灰化，最后750℃保持8h，使完全灰化。然后用2ml濃硝酸和6M鹽酸2ml分次溶解灰化物于25ml容量瓶中，加超純水至刻度。

　3.2 測定方法及測定條件用日立-518型原子吸收光譜儀，以空氣-乙炔火焰分別測定各元素的含量。測定條件見表1。

　 3.3 羅補甫克比日丸中微量元素的測定結果見表2（略）。表1 11種微量元素測定條件表2 羅補甫克比日丸中微量元素的含量

　 3.4 回收率的測定為了驗證上述結果的可靠性，筆者對以上8元素進行了回收實驗。回收率為：Ca 94%～102%，Fe 93%～103%，Cu 91%～101%，Zn 93%～102%，Mn 91%～102%，K 93%～102%，Na 92%～104%，Mg 96%～100%表明該方法可行。

　 4 討論
　（1）蛋白質廣泛存在于自然界，是一類重要的天然營養物質，羅補甫克比日丸中的蛋白質是植物性營養蛋白質。生命是物質運動的高級形式，種運動形式是通過蛋白質來實現的，故蛋白質具有多方面生理活性。羅補甫克比日丸中蛋白質含量較多即29.6026%，蛋白質經消化系統水解成人體必需的各種氨基酸容易被人體吸收，有滋補強壯、精液濃縮、益精壯陽、提神和提高人體免疫力的作用。因此，羅補甫克比日丸是一種營養價值或生理價值很高的，能補腦健身、益心填精，是具有營養和治療作用的維吾爾醫藥。

　（2）由表2可知，羅補甫克比日丸Mg、Ca、K、Na和Zn的含量較高，Fe和Cu含量次之，其他微量元素的含量較低。隨著營養學家對人體微量元素的深入研究，微量元素對人體內的細胞代謝、生物合成及生理生化功能起著重要作用。微量元素對人體內血紅蛋白的合成，皮膚、骨骼和性器官的正常發育都有重要作用；并與造血和脂肪代謝也有密切關系。微量元素還參與人體內多種酶的結構與激活，在構成體內重要的載體及電子傳遞系統方面具有重要作用。

　　微量元素在人體中保持一定的水平，維持人體的正常活動，若失去平衡，就會導致疾病的發生。微量元素必須從人體外攝取，人體自身不能產生。

　　微量元素是中藥和維藥歸經與物質基礎的主要組成部分，因此，中藥和維藥的療效不僅與其有機成分有關，還與其所含的無機元素的種類及含量有密切關系。微量元素的研究對維藥的性味功能、質量鑒定、臨床應用等方面有著重要意義。維藥的微量元素除能直接補充和調節人體內的必需而參與機體各種生理生化過程，起到營養及防治疾病作用外，還常與維藥中的藥效有機成分形成復合物，產生協同或拮抗作用，從而增強維藥療效。羅補甫克比日丸的作用很可能與其含有的蛋白質含量及對人體有益微量元素特別是鎂、鈣、鋅、鐵和銅等元素密切相關。所以，進一步地研究羅補甫克比日丸化學成分的種類，具有很重要的意義。

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